[发明专利]壳聚糖修饰的磁性脂质体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种磁性脂质体的制备方法，具体涉及一种壳聚糖修饰的磁性脂质体的制备方法，该脂质体可作为肠道的靶向造影剂。

背景技术

壳聚糖是一种带正电荷的天然多糖，无毒、无刺激性、无致敏性、无致突变作用，具有良好的生物相容性和生物降解性，其分子链上丰富的氨基和羟基使其易于进行化学修饰而被赋予多种功能基团。壳聚糖作为药物载体可以控制药物释放、延长药物疗效、降低药物毒副作用，提高疏水性药物对细胞膜的通透性和药物的稳定性及改变给药途径，还可以大大加强制剂的靶向给药能力。最近研究表明，壳聚糖具有生物粘附性，能有效增加药物通过眼部、鼻腔及胃肠道粘膜上皮的吸收，而且该化合物重要特性之一是能被结肠厌氧菌丛分泌专属性的酶降解。因此，壳聚糖对结肠有靶向作用。

利用壳聚糖来修饰脂质体，不仅对药物有保护和促渗作用，提高药物的缓释性，还可以增加药物的靶向性，从而达到提高生物利用度的效果。同时，它也可以降低阳离子脂质体的毒性，防止脂质体在胃肠道破坏，以达到口服结肠定位释放的目的，因此，壳聚糖脂质体复合微粒具有作为良好药物载体的潜能。

磁共振成像(MRI)技术可以对生物内脏器官和软组织进行无损的快速检测。而磁共振成像(MRI)I技术主要是通过磁共振造影剂来实现的。目前，临床上常用的磁共振造影剂为Gd-DTPA。但Gd-DTPA有一些不足之处，如：循环时间短、注射后Gd-DTPA可迅速通过细胞间隙、经肾脏排泄、在体内分布没有特异性、价格较昂贵等。因此，寻求价格低廉且具有特异性的造影剂是当前研究的热点。相比较而言，磁性纳米粒子作为磁共振造影剂，安全性较好，且易于将特异性配体连接到造影剂表面，使它选择性地与相应受体结合，从而达到特异性增强靶区超声信号或局部靶向治疗的目的，因此很受临床应用的欢迎。

发明内容

本发明目的在于针对现有技术的不足，提供一种壳聚糖修饰的磁性脂质体的制备方法，工艺简单，生产成本低，所得壳聚糖修饰的磁性脂质体稳定性好，能进一步满足生产和应用的需求。

本发明提供一种壳聚糖修饰的磁性脂质体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a、配置浓度为10-20mg/ml三氯化铁、5-10mg/ml二氯化铁和5-10mg/ml表面活性剂的溶液，将该溶液在50-80℃及惰性气氛下、剧烈搅拌30分钟后，用氢氧化钠溶液调节pH值为8-11；保持温度，继续搅拌30分钟后，离心分离，分别用去离子水、乙醇洗涤；

b、配置浓度为10-20mg/ml磷脂和10mg/ml助表面活性剂的氯仿、蒸馏水溶液，氯仿与水的体积比为3∶1-1∶3；将该溶液在旋转蒸发仪上真空旋转蒸发形成薄膜；加入pH＝7.4的磷酸盐缓冲液和四氧化三铁纳米磁性粒子，用探头超声60分钟后，离心分离，弃上清液及瓶底未包封的磁性材料，取中层褐色水性悬浊液，即制得磁性脂质体溶液；

c、配置浓度为20mg/ml壳聚糖醋酸溶液，磁性搅拌12小时，将磁性脂质体溶液缓慢滴加到壳聚糖醋酸溶液中，继续搅拌2小时，即制得壳聚糖修饰的磁性脂质体。

所述的表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵、或十二烷基硫酸钠、或聚乙二醇辛基苯基醚。

所述的助表面活性剂为胆固醇、或正辛醇、或丙三醇。

所述的壳聚糖为脱乙酰度为50-95％的壳聚糖。

本发明的制备方法简单，可操作性强，能进一步满足生产和应用的需求；本发明制备的造影剂具有良好的物理化学稳定性；本发明中采用壳聚糖对肠粘膜具有良好的特异性，有利于提高造影剂的有效利用率。

本发明制备的壳聚糖修饰的磁性脂质体在肠道造影剂方面有很好的应用，且制备工艺简单，生产成本低，所得的造影剂稳定性好，能进一步满足生产和应用的需求。

具体实施方式

以下通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明，而不限制本发明的范围。

实施例1

1、四氧化三铁纳米磁性粒子的制备

在10毫升水中，分别加入02克三氯化铁，0.1克二氯化铁和0.05克聚乙二醇辛基苯基醚，配置成浓度为20mg/ml三氯化铁、10mg/ml二氯化铁和5mg/ml聚乙二醇辛基苯基醚的溶液。将该溶液在50℃及惰性气氛下、剧烈搅拌30分钟后，用3M氢氧化钠溶液调节pH值为8。保持温度，继续搅拌30分钟后，离心分离，分别用去离子水、乙醇洗涤，即制得四氧化三铁纳米磁性粒子。

2、磁性脂质体的制备