[发明专利]高效降解羽毛角蛋白的菌株及其筛选方法

权利要求书

1.一种高效降解羽毛角蛋白的菌株，其特征在于：经16SrDNA序列分析鉴定结果和Biolog系统鉴定结果，确定F4为地衣芽孢杆菌，命名为Bacillus licheniformis F4，保藏于：中国微生物菌种保藏中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院中科院微生物研究所保藏日期为：2010年10月22日保藏编号为：CGMCC NO.4229。

2.一种高效降解羽毛角蛋白的菌株的筛选方法，其特征在于，步骤如下：

(1)初步筛选

将鸡粪样品溶解于的蒸馏水中，稀释后涂布于初筛培养基，分别在30-60℃条件下培养20-30h，筛选长有菌落的平板，30-60℃培养条件下，取菌体生长较快，菌落较大的菌落；

(2)富集培养

在无菌条件下，用无菌水冲洗步骤(1)温度下的初筛培养基上的菌落，接入富集培养基，在步骤(1)温度下，100-150rpm/min条件下富集培养40-60h；

(3)分离培养

将40-60h富集培养后的菌液稀释后，涂布于LA平板在步骤(1)温度下培养20-30h，挑取了不同形态单菌落LA平板划线保存；

(4)复筛

经分离纯化后的单菌落接种到含有筛选培养基的摇瓶发酵，观察培养液中完整羽毛的降解程度，将振荡培养的发酵液过滤，测定角蛋白酶活和甲醛滴定法测定滤液内氨基氮含量，发酵培养55-75h后，完全脱去了羽毛中的小羽枝，且羽梗和羽枝被完全被降解；

所述：初筛培养基(g/ml)的成分为：2％羽毛粉、2％琼脂粉，其余为水；

富集培养基(g/ml)：2％羽毛粉、1％蛋白胨、0.5％酵母浸出粉、1％NaCl，其余为水；

筛选培养基(g/ml)：2％羽毛粉，0.1％K2HPO4，KH2PO4 0.04％、NaCl 0.04％，灭菌后的完整羽毛，其余为水；

LA平板(g/ml)：1％蛋白胨、0.5％酵母浸出粉、1％NaCl、2％琼脂，其余为水。