[发明专利]转基因棉花检测芯片、试剂盒及应用

权利要求书

1.转基因棉花检测芯片，所述芯片包括基片和位于基片上的核酸探针，所述核酸探针包括选自核苷酸序列为SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.8、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.14、SEQ ID NO.17、SEQ ID NO.20和SEQ ID NO.23的核酸探针中的一种或多种核酸探针，其中在所述探针的5’端从5’到3’方向依次连接有醛基和10-20个脱氧腺嘌呤核苷酸残基。

2.如权利要求1所述的转基因棉花检测芯片，其中所述芯片为可视芯片。

3.如权利要求1或2所述的转基因棉花检测芯片，所述基片由聚苯乙烯材料、玻璃片或经处理的硅片构成，或为可商购的空白芯片。

4.如权利要求1或2所述的转基因棉花检测芯片，所述芯片还包括阳性对照和阴性对照。

5.一种转基因棉花检测试剂盒，所述试剂盒包括如权利要求1-4中任一项所述的转基因棉花检测芯片和用于PCR扩增的特异性寡核苷酸引物对，所述引物对包括以下一对或多对引物：

用于扩增转基因棉花品系3006-210-23的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；扩增转基因棉花品系281-24-236的SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4；扩增转基因棉花品系LLCOTTN 25的SEQ IDNO.6和SEQ ID NO.7；扩增转基因棉花品系Mon531的SEQ IDNO.9和SEQ ID NO.10；扩增转基因棉花品系Mon15985的SEQID NO.12和SEQ ID NO.13；扩增转基因棉花品系Mon1445的SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16；扩增转基因棉花品系GHB614的SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.19；扩增转基因棉花品系GK12的SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22，所述引物的5’端连接有共价结合的生物素。

6.如权利要求5所述的转基因棉花检测试剂盒，其还包括用于可视性检测转基因棉花的辣根过氧化物酶标记的亲和素抗体和辣根过氧化物酶的底物。

7.如权利要求6所述的转基因棉花检测试剂盒，其中所述辣根过氧化物酶的底物为四甲基联苯胺。

8.检测转基因棉花的方法，所述方法包括：

(1)提取待测棉花的DNA，所述棉花包括棉花原料或棉花加工产品；

(2)使用以下一对或多对引物进行PCR扩增；

用于扩增转基因棉花品系3006-210-23的SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；扩增转基因棉花品系281-24-236的SEQ ID NO.2和SEQ ID NO.4；扩增转基因棉花品系LLCOTTN 25的SEQ IDNO.6和SEQ ID NO.7；扩增转基因棉花品系Mon531的SEQ IDNO.9和SEQ ID NO.10；扩增转基因棉花品系Mon15985的SEQID NO.12和SEQ ID NO.13；扩增转基因棉花品系Mon1445的SEQ ID NO.15和SEQ ID NO.16；扩增转基因棉花品系GHB614的SEQ ID NO.18和SEQ ID NO.19；扩增转基因棉花品系GK12的SEQ ID NO.21和SEQ ID NO.22，所述引物的5’端连接有共价结合的生物素。

(3)将PCR扩增产物与权利要求1-3中任一项所述的转基因棉花检测芯片杂交；

(4)将步骤(3)的芯片与辣根过氧化物酶标记的亲和素抗体杂交，洗涤；和

(5)在步骤(4)的芯片上加入辣根过氧化物酶的底物进行反应，水洗，干燥；

(6)观察颜色变化，确定所述待测棉花是否为转基因棉花。

9.如权利要求8所述的检测转基因棉花的方法，其中所述辣根过氧化物酶的底物为四甲基联苯胺。

10.权利要求1-4中任一项所述的转基因棉花检测芯片或权利要求7的转基因棉花检测试剂盒在检测转基因棉花中的应用。