[发明专利]利用真菌白地霉发酵香料烟籽制备烟用香料的方法

说明书

技术领域

本发明涉及烟用香料，具体涉及以烟籽为原料通过白地霉发酵制备烟用香料的方法。

背景技术

香料烟为复合型卷烟的重要原料。风干的香料烟籽呈棕褐色，含油脂33～42%，含蛋白质19～30%。云南为烟草生产大省，每年产生数十万吨的香料烟籽， 是理想的烟用天然香料原料。但由于其含油脂较多，一般的化学方法处理得到的粗提产物难以直接应用于烟草加香，所以除少部分的烟籽用于育种外，大部分被作为废物堆放或遗弃，造成极大浪费。

许多微生物能够大量产生脂肪降解酶。利用这些微生物降解香料烟籽中存在的大量油脂，将高级脂肪酸转化为低级脂肪酸或其他小分子有机酸开发新型烟用天然香料，具有广阔的前景。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用真菌白地霉发酵香料烟籽制备烟用香料的方法，通过筛选出转化香料烟籽油脂的高效微生物，应用最佳的发酵条件，开发以香料烟籽为原料的新型烟用香料。

本发明的技术方案如下：

一种利用真菌白地霉发酵香料烟籽制备烟用香料的方法，所述发酵制备的步骤如下：

1）液体培养：将真菌白地霉接入装有30mL液体种子培养基的250mL三角瓶中，种子培养基为MM培养基，以1%浓度的香料烟种子油作为碳源，pH为6.0，28℃，200r/min 振荡培养4d；

2）固体培养：将步骤1液体培养获得的菌种按5～10%浓度接入固体培养基，培养基为细碎香料烟种子100g，加1~4g的蔗糖、150mL的蒸馏水，自然pH，培养基厚度为2～3cm，湿度控制在100%，温度为28~32℃，碳源补充量为2~8%，发酵2~8d，发酵结束后进行致香成分提取；

3）用95%浓度乙醇按液固比3：1提取烟籽2~4次，合并提取液，过滤，减压浓缩，待除去约2/3体积的溶剂后冷冻，除去析出的油脂层，再减压浓缩，得到棕黄色液体提取物。

其进一步的技术方案为：

所述步骤1中选择白地霉菌株GC4作为发酵菌株。

所述步骤2中的菌株发酵时间为5天。

所述步骤2中的菌株发酵温度为30℃。

所述步骤2中的碳源补充量为5%。

本发明的有益技术效果是：

1、将白地霉接入香料烟籽，于适宜条件下进行发酵，可使香料烟烟籽中的油脂发生降解，产生多种对卷烟抽吸品质有重要影响的香味物质。

2、通过微生物发酵香料烟籽的提取物能与卷烟烟香较好谐调，使主体香气突出，香气更加圆润，具有良好的醇和烟气、改善吸味的效果。

3、采用白地霉发酵香料烟籽是一种有效利用废弃香料烟籽生产烟用香料的新途径，经济高效且可定向生产。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明做进一步说明。

实施例1

1）液体培养：以真菌白地霉（Geotrichum candidum）接入装有30mL液体种子培养基的250mL三角瓶中，种子培养基为MM培养基，以1%浓度的香料烟籽油作为碳源，pH为6.0，28℃，200r/min振荡培养4d。

2）固体培养：将以上液体培养获得的菌种按5~10%接入固体培养基，培养基为细碎香料烟种子100g，加1~4g的蔗糖、150mL的蒸馏水，自然pH。培养基厚度为2~3cm，湿度控制在100%，温度为28℃，碳源补充量为2%，发酵时间为2d发酵结束后进行致香成分提取。

3）用95%乙醇按液固比3：1提取烟籽2次，合并提取液，过滤，减压浓缩，待除去约2/3体积的溶剂后冷冻，除去析出的油脂层，再减压浓缩，得到棕黄色液体提取物。

实施例2

1）液体培养：以真菌白地霉（Geotrichum candidum）接入装有30mL液体种子培养基的250mL三角瓶中，种子培养基为MM培养基，以1%浓度的香料烟籽油作为碳源，pH为6.0，28℃，200r/min振荡培养4d。

2）固体培养：将以上液体培养获得的菌种按5~10%接入固体培养基，培养基为细碎香料烟种子100g，加1~4g的蔗糖、150mL的蒸馏水，自然pH。培养基厚度为2~3cm，湿度控制在100%，温度为30℃，碳源补充量为5%，发酵时间为8d发酵结束后进行致香成分提取。

3）用95%乙醇按液固比3：1提取烟籽3次，合并提取液，过滤，减压浓缩，待除去约2/3体积的溶剂后冷冻，除去析出的油脂层，再减压浓缩，得到棕黄色液体提取物。

实施例3