[发明专利]制备纯化脂肽的方法

权利要求书

1.纯化的脂肽，其中所述脂肽为达托霉素，其纯化方法包含提供脂 肽的无定形制备物和使所述脂肽结晶的步骤，使脂肽结晶的方法包含下 列步骤：

a.提供所述脂肽的溶液，其中将200mg纯度为97.1%的达托霉素溶于 2.54ml水且将达托霉素溶液按顺序先后与10.0ml甲醇、0.78ml1M pH为 6.0的乙酸钙、9.50ml丙二醇和2.20ml50%(w/v)PEG4000混合；

b.允许脂肽在室温下从溶液中结晶出来，其中在室温下将混合物在血 液学混合机内颠倒10-14小时，然后在1000rpm下离心15分钟以收获晶 体；

c.将晶体混悬在12.5ml异丙醇中；

d.将达托霉素混悬液转移到Biorad柱上且借助重力滴下而除去异丙 醇，然后用氮气流干燥晶体且在干燥工艺期间打碎所有结块，得到均匀 的干燥样品；

e.收集样品；

其中

使所述脂肽从被缓冲至pH6.0的溶液中结晶出来。

2.根据权利要求1的纯化的脂肽，其中在步骤e中样品是在Siemens D500自动粉末衍射测定仪ORS1D No.LD-301-4上进行分析的且按照 ORS标准操作工艺EQ-27Rev.9操作仪器。

3.根据权利要求1的纯化的脂肽，其中所述脂肽的制备物经过一种 或者多种选自下述的纯化步骤：疏水作用色谱(HIC)、阴离子交换色谱、 微过滤和超滤。

4.根据权利要求3的纯化的脂肽，其中在所述超滤中：

a.改变脂肽溶液的pH、温度和/或盐浓度，以便脂肽形成胶束；并且

b.在这样的条件下在超滤膜上过滤脂肽溶液，其中脂肽胶束被留在膜 上，而更小的杂质穿过滤器。