[发明专利]从紫山药中提取纯化尿囊素的方法

权利要求书

1.一种从紫山药中提取纯化尿囊素的方法，其特征在于包括如下步骤：对紫山药进行水提，过滤浓缩提取液，絮凝剂除杂、树脂除杂，最后通过活性炭进行吸附纯化。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：将紫山药制备成干粉，通过常温常压搅拌对紫山药干粉进行水提，高速离心过滤浓缩提取液，浓缩液通过絮凝剂除杂、树脂除杂，最后通过活性炭进行吸附纯化。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将紫山药洗净，切片，干燥后磨成细粉；

2)称取紫山药粉，加入7-20倍蒸馏水，常温常压搅拌2-6小时，得提取液；

3)4000rpm-8000rpm转速下高速离心提取液并过滤，得到滤液；

4)向滤液中依次加入絮凝剂B和A，B剂在恒温40-80℃边搅拌边加入，恒温下保持2小时，每隔半个小时搅拌一次；然后常温下将滤液冷却，边搅拌边加入A剂，静置过夜，去除部分大分子蛋白质与多糖；

5)絮凝后样品高速离心10-20min，速率为4000rpm-8000rpm，得纯净上清液，过AB-21树脂层析柱，去除色素，收集层析液；

6)层析液过活性炭柱，乙醇水溶液洗脱，收集洗脱液，将洗脱液旋转蒸发进行浓缩，得到尿囊素浓缩液；

7)浓缩液进行低温下放置12h以上，得到尿囊素结晶，进一步干燥获得尿囊素纯品。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)将紫山药洗净，切片，干燥后磨成细粉；

2)称取紫山药粉，加入8-10倍蒸馏水，常温常压搅拌2-4小时，得提取液；

3)6000rpm-8000rpm转速下离心提取液并过滤，得到滤液；

4)向滤液中依次加入絮凝剂B和A，絮凝剂B在恒温60-80℃边搅拌边加入，恒温下保持2小时，每隔半个小时搅拌一次；然后常温下将滤液冷却，边搅拌边加入絮凝剂A，静置过夜，去除部分大分子蛋白质与多糖；

5)絮凝后样品高速离心10-20min，速率为6000-8000rpm，得纯净上清液，过AB-21树脂层析柱，去除色素，收集层析液；

6)层析液过活性炭柱，以50％-80％乙醇水溶液进行洗脱，收集洗脱液，将洗脱液旋转蒸发进行浓缩，得到浓缩液；

7)浓缩液进行低温下放置12h以上，得到尿囊素结晶，进一步干燥获得尿囊素纯品。

5.根据权利要求1到4任意一项所述的方法，其特征在于，所述絮凝剂A选自壳聚糖、干酪素或皂土中的一种或多种。

6.根据权利要求1到4任意一项所述的方法，其特征在于，所述絮凝剂B选自变性淀粉、滑石粉、丙烯酰胺、苯乙烯磺酸盐、木质磺酸盐、丙烯酸或甲基丙烯酸中的一种或多种。

7.根据权利要求3或4所述的方法，其特征在于，所述步骤6)中活性炭柱纯化方法包括：

1)活性炭分别经100％乙醇进行醇洗和水洗以除去杂质，烘箱干燥，以水为流动相进行湿法装柱；

2)以水通柱，流动加入样品溶液；

3)以乙醇溶液洗脱，每50ml取样一次，收集100ml-500ml样品。