[发明专利]一种金丝小枣酸性多糖提取及结构表征

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物多糖提取及其结构表征，具体地说，涉及一种金丝小枣酸性多糖的提取及其结构表征，属于功能食品生物化学领域。 

背景技术

多糖是自然界中含量最丰富的生物聚合物，是多种中草药的有效成分之一，具有多种生物活性，它能提高机体的免疫功能，是理想的免疫增强剂，而对正常细胞没有毒副作用。目前，全球至少有12种以上的多糖正在用于临床试验，分别用于抗肿瘤、抗病毒、抗衰老等药物的研究中，1997年全球从植物中提取的糖类药物的销售额达73亿美元。随着多糖的制备、结构、合成、药理学及临床学研究的不断深入，多糖药物将具有更广阔的前景。因此，开发多糖类药物已成为当今世界新药研制的热点之一。 

枣(Zizyphus jujuba Mill.)别名大枣、良枣、红枣，为鼠李科(Rhamnaceae)枣属(Ziziphus Mill.)落叶乔木。它是我国最古老的果树之一，与桃、李、杏、梅一起被誉为“中国五大名果”。枣不仅是一种滋补佳品，而且也是一味传统的中药，因富含营养和保健成分而享誉中外，为我国传统药食兼用果品。我国古医学对红枣的营养、保健价值早已作了十分精辟的阐述，认为它具有补血健脑、补脾益胃、养心安神、缓和药性等功效。现代药理研究还表明，它具有抗衰老、抗肿瘤、抗变态反应、镇静、保肝、抗炎等多方面药理作用。枣的诸多功效是与其成分密切相关的。近年来，研究表明，红枣除含有丰富的维生素及Ca、P、Fe等矿物质元素，还含有生理活性极高的多糖。 

目前，随着医疗卫生事业的发展，枣越来越引起科技工作者的兴趣，并日 益增进了对枣药用价值的认识。社会经济的发展，人们生活水平的提高，人们的保健意识逐步增强，越来越要求食品向绿色型、环保型发展。本专利通过对金丝小枣酸性多糖的提取及其结构表征，为开发出药理清晰、药效明确，便于质量监控的新药提供有力的技术支持。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种金丝小枣酸性多糖的提取方法。本发明研究亚临界水和超声微波相结合提取金丝小枣多糖的方法，以金丝小枣为原料，经过去核、烘干、粉碎、醇洗去杂、亚临界水和超声微波相结合萃取、聚酰胺脱色和柱层析后得到金丝小枣酸多糖。 

本发明同时对金丝小枣酸性多糖结构进行表征，一种金丝小枣酸性多糖是由→4)-α-GalpA(1→通过O-4位与→2)-α-Rhap(1→、→2，4)-α-Rhap(1→连接形成主链，其中41.85％半乳糖醛酸羧基被甲酯化，主链中的→2，4)-α-Rhap(1→通过O-4与其它糖残基连接形成支链；→6)-β-Galp(1→、→5)-α-Araf(1→聚合形成半乳聚糖和阿拉伯聚糖是金丝小枣酸性多糖侧链的主要组成，其支链通过Gal残基和Ara残基的O-1位与主链的Rha残基的O-4相连。侧链→6)-β-Galp(1→构成的半乳聚糖通过O-3、O-4产生分支，侧链→5)-α-Araf(1→构成的阿拉伯聚糖通过O-3产生分支。 

本发明的技术解决方案流程见图1，工艺要点如下： 

1.原料粉碎 

以金丝小枣为原料进行粉碎处理，粉碎粒度80-100目。 

2.乙醇回流去杂 

将上述金丝小枣用95％工业酒精在70℃回流3次，每次2h，以钝化金丝小枣的内源性酶并去除部分单糖、低聚糖和脂类物质醇溶性成分，离心去除上清液，沉淀在70℃烘箱干燥3小时，得到金丝小枣粉。 

3.亚临界水提取 

准确称取上述干燥后的金丝小枣粉，以水作为溶剂，料液比为1∶15-1∶25(g/mL)，提取温度为150-180℃，提取时间为5-10min。 

4.超声微波萃取 

离心后的沉淀加水后，超声-微波萃取，超声功率50W，微波功率260-300W，提取时间8-15min，料液比1∶10-1∶20。 

5.脱色 

上清液合并加入聚酰胺进行搅拌30min进行脱色，然后于4000r/min条件下离心10-12分钟，收集，上清液加工业酒精调至含醇量为80％，静置过夜，离心后沉淀依次用无水乙醇、丙酮洗涤，冷冻干燥，即为金丝小枣粗多糖。 

5.层析