[发明专利]一种同时测定多种抗抑郁药血药浓度的方法

说明书

技术领域

本发明属医学检验领域，涉及体内药物的分析测定方法，尤其涉及一种同时测定多种抗抑郁药血药浓度的方法。

背景技术

抑郁症(depression)是一种常见的情感障碍性精神疾病，具有高发病率，高复发率、高致残率、高负担率的特征。

舍曲林(Sertraline)、西酞普兰(Citalopram)、氟西汀(Fluoxetine)、帕罗西汀(Paroxetine)、文拉法辛(Venlafaxine)是传统的一线抗抑郁治疗药物。由于这些药物在人体内的药代动力学个体差异较大、治疗窗窄，药物间相互作用对药动学的影响较大，药动学特性与抗抑郁的效果、药物不良反应的发生有密切的联系，因此开展对上述药物的治疗药物监测有临床意义。

目前我国抗抑郁药的药物浓度监测的方法主要为高效液相色谱法(HPLC)和免疫测定法(IM)。这类方法特异性相对较好，经济又方便。但是HPLC法的灵敏度对于治疗窗在纳克级的药物检测不能完全达到临床要求(如通常患者的舍曲林治疗浓度为10-50ng·ml^-1)，此外，HPLC法的特异性虽然优于免疫测定法，但是仅仅由保留时间作为物质的判断依据可靠性欠妥。且生物样本中干扰物较多，在保证高灵敏度、高分离度的条件下，并不能很好的进行抗抑郁药物浓度监测。

发明内容

本发明的目的在于针对现有技术的不足，提供一种同时测定多种抗抑郁药血药浓度的方法。提供一种简便、快速、灵敏的测定多种抗抑郁药血药浓度的方法。

本发明的目的是通过以下技术方案来实现的：一种同时测定多种抗抑郁药血药浓度的方法，包括以下步骤：

(1)待测样品的预处理：

(a)取血浆待测样品，按照1∶2.5(v/v)比例加入蛋白沉淀剂乙腈(含0.1％v/v甲酸)，涡旋30s，13000rpm离心5min，上清液取出。

(b)取尿液待测样品，经0.22μm微孔滤膜过滤，取续滤液按照1∶3(v/v)比例加入蛋白沉淀剂乙腈(含0.1％v/v甲酸)，涡旋30s，13000rpm离心5min，上清液取出。

(2)样品分离与分析：将步骤(1)预处理后得到的上清液注入快速液相色谱系统，在合适的液相条件下进行分离分析，最后进入三重四极质谱检测器，在合适的质谱条件下检测，最终通过色谱软件采集处理数据，计算样品中的药物浓度。

进一步地，所述合适的液相条件是：色谱柱Zorbax SB-C18(3.5μm，3.0×150mm)，流动相：甲醇(含0.1％v/v甲酸)∶水(含0.1％v/v甲酸)＝66∶34，流速0.4mL·min^-1，柱温25℃。所述合适的质谱条件是：舍曲林Sertraline m/z306.4→159.2(fragmentor 120，CE 30)，西酞普兰Escitalopram m/z 325.5→109.3(fragmentor 120，CE 30)，氟西汀Fluoxetine m/z 310.3→44.4(fragmentor 120，CE 10)，帕罗西汀Paroxetine m/z 330.3→192.3(fragmentor 120，CE 20)，文拉法辛Venlafaxine m/z 278.3→58.4(fragmentor 120，CE 20)，异丙嗪(内标)Promethazine m/z 285.3→86.3(fragmentor 120，CE 15)。

本发明的有益效果是，本发明同时测定多种抗抑郁药血药浓度的方法快速准确，灵敏可靠，分析成本低，适用于临床常规检测和药动学研究。在本发明方法测定条件下，人体内源性物质以及常用合并用药均不干扰测定。药物线性范围分别是舍曲林2.0～2000.0ng·mL^-1，西酞普兰0.5～500.0ng·mL^-1，氟西汀1.0～1000.0ng·mL^-1，帕罗西汀3.0～3000.0ng·mL^-1，文拉法辛0.4～4000.0ng·mL^-1，线性相关系数(r²)大于0.99，方法回收率大于80％，RSD小于15％。

附图说明

图1是空白血浆色谱图；

图2是空白血浆+标准品色谱图；

图3是提取离子后的空白血浆+标准品色谱图；其中，(A)为文拉法辛，(B)为异丙嗪(内标)，(C)为舍曲林，(D)为氟西汀，(E)为西酞普兰，(F)为帕罗西汀。

具体实施方式