[发明专利]一种用于高效表达抗OPN单克隆抗体的培养基

说明书

技术领域

本发明属于细胞培养领域，具体地说，涉及一种用于高效表达抗OPN单克隆抗体的培养基。

背景技术

肿瘤是严重危害我国人民生命健康的重大疾病，肿瘤手术切除后5年，生存率可达40％左右，但仍有一半左右的病人手术后出现转移复发。

肿瘤转移分子机理研究提示多种因素与肿瘤细胞转移密切相关。近年来的研究发现骨桥蛋白(Osteopontin，OPN)在肿瘤细胞转移过程中发挥了至关重要的作用(Rangaswami H，Bulbule A，Kundu GC.Osteopontin：role in cell signaling and cancer progression.Trends Cell Biol.2006 Feb；16(2)：79-87)。

因此，通过抗OPN抗体阻断OPN的促转移信号传导通路，就有可能有效阻断肿瘤细胞的黏附和迁移过程，防止肿瘤细胞向细胞基质的侵润，从而防止肿瘤的转移。单克隆抗体在其中起了重要作用，因此有不少科研工作者提供了抗OPN单克隆抗体，例如申请人为：上海国健生物技术研究院、申请号为：200710039873.3、发明名称为：骨桥蛋白的功能表位、与其特异性结合的单克隆抗体及其在制备抗肿瘤转移药物中的用途的中国专利申请；申请人为：上海中信国健药业有限公司、申请号为：200710085147.5、发明名称为：一种重组抗OPN单克隆抗体及其制备方法和用途的中国专利申请；申请人为：中国科学院上海生命科学研究院、申请号为：200910051737.5、发明名称为：抗骨桥蛋白OPN单克隆抗体及其应用的中国专利申请等。

但在上述专利申请中，均只采用了常规的培养方法，而未能提供合适/专门的培养抗OPN单克隆抗体的方法。

因此，有必要提供一种能高效表达抗OPN单克隆抗体的方法，从而高表达的提供抗OPN单克隆抗体，以降低生产成本。

发明内容

本发明的目的在于，提供一种用于高效表达抗OPN单克隆抗体的培养基，以弥补现有技术的不足。

本发明还有一个目的在于，提供一种使用本发明提供的培养基培养表达抗OPN单克隆抗体的菌株的方法。

本发明提供的用于高效表达抗OPN单克隆抗体的培养基为在培养基DMEM/F12中加入：

维生素C       10～25mg/L；

乙醇胺        1～10mg/L；

亚硒酸盐      0.01～0.045mg/L；

羟基丁酸钠    0.5-1.5mg/L；

AlCl₃·6H₂O   0.5～2.5mg/L

CoCl₂·6H₂O   0.05～0.3mg/L；

CuSO₄·5H₂O   0.002～0.004mg/L；

KBr           0.0005～0.0008mg/L；

NiCl₂·6H₂O   0.02～0.25mg/L；

ZnSO₄·7H₂O   0.5～2.5mg/L；

维生素B6      0.01～0.2mg/L；

维生素B12     0.01～0.5mg/L；

生物素          0.05～0.18mg/L；

还原型谷胱甘肽  0.5～2.5mg/L

核糖            2.0～8.5mg/L；

HEPES           500～3000mg/L。

根据本发明的一个优选实施例，在培养基DMEM/F12中加入：

维生素C         10.5mg/L；

乙醇胺          10mg/L；

亚硒酸盐        0.028mg/L；

羟基丁酸钠      0.5mg/L；

AlCl₃·6H₂O     2.5mg/L；

CoCl₂·6H₂O     0.15mg/L；

CuSO₄·5H₂O     0.002mg/L；

KBr             0.0006mg/L；