[发明专利]还原型谷胱甘肽的合成方法

权利要求书

1.一种还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：包括以下步骤：

⑴、R-谷氨酸的制备：

将谷氨酸在 1 mol／L的氢氧化钠溶液中溶解，冰盐水浴冷却，在搅拌下缓慢滴加保护剂R，同时滴加氢氧化钠溶液维持反应液pH=8.5-9.5，温度维持在0-5℃，加毕后，将温度升至室温，继续搅拌反应2-3h，停止反应，用乙醚洗两次，醚层弃去，洗液用乙酸乙酯萃取，用5％氯化钠溶液将萃取后的乙酸乙酯层洗至中性，加无水硫酸钠干燥，蒸除乙酸乙酯，即得白色固体，加入石油醚，在冰浴中研磨至固体状，立即加入石油醚，得白色粉末状固体，在冰箱中放置过夜，过滤，用石油醚洗涤、干燥后得到产物R-谷氨酸；

⑵、R-谷氨酸酐的制备：

    向步骤⑴得到的R-谷氨酸中加入醋酐，搅拌下回流反应2-4h，停止反应，降温至室温，经旋转蒸发除去溶剂，即得到白色固体R-谷氨酸酐；

⑶、R-谷氨酸-α-苄酯的制备：

向步骤⑵得到的R-谷氨酸酐中加入苯甲醇，搅拌下回流反应3-5h，停止反应，降温至室温，经旋转蒸发除去溶剂，得到白色固体R-谷氨酸-α-苄酯；

⑷、R-谷氨酸-α-苄酯-γ-酰氯的制备：

向步骤⑶得到的R-谷氨酸-α-苄酯中加入四氢呋喃，再加入PCl₅，保持反应温度15-20℃，反应0.5-1h，过滤，滤液浓缩，浓缩液加入石油醚，出现沉淀，过滤，石油醚洗，干燥，得到产物R-谷氨酸-α-苄酯-γ-酰氯；

⑸、R-谷氨酸-α-苄酯-胱氨酸的制备：

将胱氨酸加入四氢呋喃中，冷却至0-5℃，同时加入R-谷氨酸-α-苄酯-γ-酰氯，再逐滴滴入2N氢氧化钠溶液，升高温度至室温，搅拌反应0.5-1h，蒸除四氢呋喃，剩余物用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥，蒸除乙酸乙酯得到产物R-谷氨酸-α-苄酯-胱氨酸；

⑹、甘氨酸-苄酯盐酸盐的制备：

取苯甲醇降温至0-5℃， 并滴加氯化亚砜，升温至室温，加入甘氨酸，反应1-2h，蒸除苯甲醇，得到白色固体，石油醚洗，干燥，得产物甘氨酸-苄酯盐酸盐；

⑺、双R-S-S-谷胱甘肽-四苄酯的制备：

将R-谷氨酸-α-苄酯-胱氨酸与二氯甲烷和三乙胺混合，加入甘氨酸-苄酯盐酸盐，再在0℃反应4.5-6h，蒸除溶剂，剩余物加入乙酸乙酯，水洗，干燥，蒸除乙酸乙酯，剩余物加入石油醚得到产物双R-S-S-谷胱甘肽-四苄酯；

⑻、还原型谷胱甘肽的制备：

将双R-S-S-谷胱甘肽-四苄酯加入2N氢氧化钠溶液，回流反应8-10h，剩余物加水，再通过离子交换柱进行离子交换，用乙酸乙酯洗脱，蒸除乙酸乙酯得到白色固体R-S-S-谷胱甘肽，将此白色固体R-S-S-谷胱甘肽加入乙醇中，加入In/NH4Cl，回流反应2小时得到还原型谷胱甘肽。

2.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑴中谷氨酸与保护剂R物质量的比为：1: 1.2。

3.根据权利要求1或2所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的保护剂R为醋酐、酰氯、BOC、CBZ或者FMOC的其中任意一种。

4.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑵中R-谷氨酸与醋酐的物质量的比为：1:10。

5.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑶中R-谷氨酸酐与苯甲醇的物质量的比为：1:10。

6.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑷中R-谷氨酸-α-苄酯与PCl₅的物质量的比为：1:1.5。

7.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑸中胱氨酸与R-谷氨酸-α-苄酯-γ-氯化物的物质量的比为：1: 1。

8.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑹中氯化亚砜与甘氨酸的物质量的比为：1.3:1。

9.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑺中R-谷氨酸-α-苄酯-胱氨酸、三乙胺以及甘氨酸-苄酯盐酸盐的物质量的比为：1: 2.6:2.4。

10.根据权利要求1所述的还原型谷胱甘肽的合成方法，其特征在于：所述的步骤⑻中双R-S-S-谷胱甘肽-四苄与In/NH4Cl物质量的比为1: 0.01。