[发明专利]植物耐低温蛋白TCF1及编码基因和应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下(a)或(b)：

(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)将序列1的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且与植物耐逆性相关的由序列1衍生的蛋白质。

2.编码权利要求1所述蛋白的基因，优选为如下1)或2)或3)的DNA分子：

1)序列表中序列2自5’端第67至1527位核苷酸所示的DNA分子；

2)序列表中序列2所示的DNA分子；

3)与1)或2)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码耐逆性相关蛋白的DNA分子。

3.含有权利要求2所述基因的重组表达载体、表达盒、重组菌和转基因植株。

4.如权利要求3所述的重组表达载体，其特征在于：所述重组表达载体具体可为pCAMBIA1300-35S-TCF1，pEZR(K)LC-35S-GFP-TCF1，pEZR(K)LC-P_TCF1-GFP-TCF1和pCAMBIA1391-P_TCF1-GUS；

所用载体为pCAMBIA1300和pEZR(K)LC，所述pCAMBIA1300-35S-TCF1为将所述基因插入pCAMBIA1300的多克隆位点得到的重组质粒，优选为将序列表中序列2自5′端第67-1527位核苷酸所示的DNA片段插入pCAMBIA1300的限制性内切酶KpnI和SalI酶切识别位点之间得到的重组质粒；所述pEZR(K)LC-35S-GFP-TCF1为将所述基因插入pEZR(K)LC的多克隆位点得到的重组质粒，优选为将序列表的序列2自5′端第67-1527位核苷酸所示的DNA片段插入pEZR(K)LC的限制性内切酶EcoRI和SalI酶切识别位点之间得到的重组质粒；所述pEZR(K)LC-P_TCF1-GFP-TCF1是以pEZR(K)LC-35S-GFP-TCF1载体为基础，将TCF1基因自身启动子片段(序列3)取代35S启动子获得的重组质粒，优选为将序列表中序列3所示的DNA片段插入到pEZR(K)LC-35S-GFP-TCF1载体的限制性内切酶HindIII和SacI切识别位点之间得到的重组质粒；pCAMBIA1391-P_TCF1-GUS是将TCF1基因自身启动子片段(序列3)克隆到双元载体pCAMBIA1391上而获得的重组载体。

5.一种培育耐寒性转基因植物的方法，是将权利要求2所述基因通过权利要求3或4所述重组表达载体导入目的植物中，得到耐逆性高于所述目的材料的转基因植株。

6.如权利要求5所述的方法，其特征在于：权利要求2所述基因通过权利要求3或4所述重组表达载体导入所述目的植物。

7.如权利要求5和6所述，其特征在于：所述耐逆性为耐寒。

8.如权利要求5和6所述的材料，其特征在于：所述目的植物为拟南芥，优选为哥伦比亚生态型拟南芥；所述方法为将权利要求2所述基因通过所述35S-TCF1导入所述目的植物中。

9.扩增权利要求2所述基因或其任意片段的引物对。

10.扩增权利要求2所述基因的启动子序列。