[发明专利]一种利用专性厌氧巴氏梭菌发酵制氢的方法

权利要求书

1.一种利用专性厌氧巴氏梭菌发酵制氢的方法，其特征在于，在无菌厌氧条件下，利用厌氧菌，以蛋白胨、牛肉膏、酵母提取物、Na₂HPO₄ 、L-半胱氨酸、L-半胱氨酸盐酸盐一水、刃天青指示和蒸馏水组成的混合物为培养基，以葡萄糖为发酵底物，采用分批发酵的方式进行制氢，所述的专性厌氧菌为巴氏梭菌JCM1408^T。

2.如权利要求1所述的利用专性厌氧巴氏梭菌发酵制氢的方法，其特征在于，培养基的组成为：蛋白胨10.0～15.0g、牛肉膏2.0～3.0 g、酵母提取物5.0～10.0g、Na₂HPO₄  3.0～4.0g、L-半胱氨酸0.2～0.5g、L-半胱氨酸盐酸盐一水0.2～0.5g、0.2％wt的刃天青指示剂1mL、马血清40~60ml和蒸馏水1L。

3.如权利要求1所述的利用专性厌氧巴氏梭菌发酵制氢的方法，其特征在于，所述的发酵底物葡萄糖的浓度为5.0～20.0g/L。

4.如权利要求1所述的利用专性厌氧巴氏梭菌发酵制氢的方法，其特征在于，具体步骤为：无菌厌氧环境下，将培养基用磷酸盐缓冲液调pH为5.5～6.5，水浴加热瓶内培养基，同时从瓶口充氮气5分钟，待液相变为无色，最后封上瓶盖，115℃高温灭菌，烘干后将巴氏梭菌的菌株接种至装有培养基的瓶中，在37～40℃条件下静置培养至OD₆₀₀值为1.402后作为接种物，然后将接种物与培养基按体积比1：10~40的比例接种于发酵瓶中的培养基中得到发酵液；于37～40℃条件下进行恒温振荡培养，连续产氢。