[发明专利]一种芒属植物南荻体胚组培快速繁殖方法有效

专利信息
申请号: 201010590080.2 申请日: 2010-12-15
公开(公告)号: CN101999319A 公开(公告)日: 2011-04-06
发明(设计)人: 刁英;胡中立;赵玲玲;胡晖;胡小虎;周发松 申请(专利权)人: 湖北光芒能源植物有限公司
主分类号: A01H4/00 分类号: A01H4/00
代理公司: 武汉宇晨专利事务所 42001 代理人: 王敏锋
地址: 430074 湖北省武汉市武汉*** 国省代码: 湖北;42
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摘要:
搜索关键词: 一种 植物 南荻体胚组培 快速 繁殖 方法
【权利要求书】:

1.一种芒属植物南荻体胚组培快速繁殖方法,其步骤是:

A、幼穗选取:选取处于颍花原基形成期的幼穗; 

B、用初代诱导培养基诱导:将其剪成2-3厘米小段,先用75%体积比的酒精消毒25-35s,然后用0.1%质量体积比的氯化汞浸泡3-5分钟,再用无菌水冲洗2-4次,将其接种在幼穗的初代诱导培养基上,经过30-35天的初代诱导,获得胚性愈伤,培养条件为24-28℃,每天光照14-16个小时,光强为2000LX,初代诱导培养基为:A:MS培养基附加激动素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D1-5mg/L,蔗糖30g/L, PhytagelR 3g/L或B:MS培养基附加激动素KT1-4mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D1-3mg/L,6水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L, PhytagelR 3g/L;

C、用生苗培养基继代培养:所获得的胚性愈伤在继代培养基上继代生苗,30-35天继代一次,增殖系数为2-3,培养条件为24-28℃,每天光照14-16个小时,光强为2000LX,所述的生苗培养基配方为:A:MS培养基附加激动素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D1-3mg/L,蔗糖30g/L, PhytagelR 3g/L或B:MS培养基附加激动素KT1-2mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D01-2mg/L, 6水氯化镁MgCl2·6H2O800mg/L,蔗糖30g/L, PhytagelR 3g/L,将胚型愈伤转到其中一种生苗培养基之后2-4天,愈伤开始转绿,6-8天开始分化出芽,9-11天形成小幼苗;

D、用生根诱导培养基生根诱导:所生幼苗在在生根诱导培养基上诱导生根,培养25-30天,生根率达40%以上,培养条件为24-28℃,每天光照14-16个小时,光强为2000LX,生根诱导培养基为:A:1/2 MS培养基附加激动素KT1-3mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D0.5-2mg/L,蔗糖30g/L,PhytagelR 3g/L或B:MS培养基附加激动素KT1-3mg/L,2,4二氯苯氧乙酸2,4-D0.5-2mg/L,蔗糖30g/L,活性炭3-8g/L,PhytagelR3g/L,将长到10-15厘米的幼苗转到任意一种生根培养基上,5天幼苗就会分化出白色或黄色的根;

E、驯化移栽:在温室内,将生长健壮的、株高在5-6厘米的组培苗移栽到由沙子组成的驯化苗圃中驯化,每天定期给幼苗喷施驯化培养液和清水,15-20d后,视幼苗长势,移栽到苗圃中,温室条件为15℃-25℃,照明使用卤光,光照14-16个小时,光照强度为2000LX,获得了南荻幼苗。

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