[发明专利]一种检测寄生虫病的蛋白芯片及其试剂盒和制备方法

权利要求书

1.一种检测寄生虫病的蛋白芯片，由一个固相载体构成，其特征在于：所述的固相载体上分别固定有囊虫抗原、广州管圆线虫抗原、卫生并殖吸虫抗原、旋毛虫抗原和裂头蚴抗原，所述的囊虫抗原、广州管圆线虫抗原、卫生并殖吸虫抗原、旋毛虫抗原和裂头蚴抗原呈矩阵式排列。

2.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的囊虫抗原为囊虫粗抗原、纯化后的天然抗原蛋白片段或重组表达抗原。

3.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的广州管圆线虫抗原为广州管圆线虫粗抗原、纯化后的天然抗原蛋白片段或重组表达抗原。

4.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的卫氏并殖吸虫抗原为卫氏并殖吸虫粗抗原、纯化后的天然抗原蛋白片段或重组表达抗原。

5.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的旋毛虫抗原为旋毛虫粗抗原、纯化后的天然抗原蛋白片段或重组表达抗原。

6.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的裂头蚴抗原为旋毛虫粗抗原、纯化后的天然抗原蛋白片段或重组表达抗原。

7.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的固相载体上还固定有阴性反应对照，所述的阴性反应对照物为点样的缓冲液。

8.如权利要求7所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的点样的缓冲液为pH值在9.0-10.0之间的碳酸盐缓冲液。

9.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的固相载体上还固定有阳性反应对照，所述的阳性反应对照物为羊抗人IgG或者羊抗人IgM。

10.如权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的固相载体上还固定有质量控制对照物，所述的质量控制对照物为荧光素标记的羊抗人IgG或者荧光素标记的羊抗人IgM。

11.如权利要求10所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片，其特征在于：所述的荧光素标记物为异硫氰酸荧光素或花青类荧光素。

12.一种试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中含有权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片。

13.如权利要求12所述的一种试剂盒，其特征在于：还含有反应液、囊虫病病人血清样本、广州管圆线虫病病人血清样本、卫生并殖吸虫病病人血清样本、旋毛虫病病人血清样本、裂头蚴病病人血清样本、健康人血清样品、稀释液和洗涤液。

14.如权利要求13所述的一种试剂盒，其特征在于：所述的反应液为荧光素标记的羊抗人IgG或者羊抗人IgM。

15.如权利要求13所述的一种试剂盒，其特征在于：所述的稀释液内含质量百分比为0.8-0.9％的NaCl、质量百分比为1.1-1.5％Tris、质量百分比为0.05-0.2％的Tween 20、质量百分比为.05-0.3％的酪氨酸。

16.如权利要求13所述的一种试剂盒，其特征在于：所述的洗涤液内含质量百分比为0.8-0.9的NaCl、质量百分比为1.1-1.5％Tris、质量百分比为0.05-0.2％的Tween 20，pH值在7.0-9.0之间。

17.权利要求1所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片的制备方法，其特征在于包括如下步骤：

1)将囊虫抗原、广州管圆线虫抗原、卫生并殖吸虫抗原、旋毛虫抗原和裂头蚴抗原溶于pH值为9.0-10.0的碳酸盐缓冲液中，然后用芯片自动点样系统将蛋白质点制在固相载体上，点样密度为16-200点/cm²，点样量为0.1-10ng/点；

2)2-8℃放置过夜固定；

3)用封闭液将蛋白芯片的未点样部位封闭并冻干处理，2-8℃贮存备用。

18.如权利要求17所述的一种检测寄生虫病的蛋白芯片的制备方法，其特征在于：所述的封闭液中含有TBS溶液和质量百分比为1-9％的蔗糖、质量百分比为1-9％的牛血清白蛋白、质量百分比为0.05-0.2％的Tween 20、质量百分比为0.05-0.3％的酪氨酸、质量百分比为0.2-1％NaN₃，其中TBS含有质量百分比为0.8-0.9％NaCl和质量百分比为1.1-1.5％Tris。