[发明专利]一种高油脂小球藻培养液及其培养方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种高油脂小球藻培养液及其培养方法。

背景技术

微藻生物技术属于生命科学研究领域的一个重要分支，是目前国内外的研究热点和前沿。微藻中的小球藻是一种具有重要经济价值的生物资源,有着巨大的应用和开发潜力。小球藻是人类最早分离培养的一种绿藻，属于具有真核细胞的最简单光合作用有机体，它富含蛋白质、不饱和脂肪酸、类胡萝卜素、叶黄素、虾青素和多种维生素,具有极高的营养价值和提高免疫力的功能。另外小球藻还含有一种非常重要的成分——小球藻生长因子,它既具有诱发干扰素、激发人体防御和免疫组织中的巨噬细胞、T 细胞和B 细胞的功能,又具有促进人体对环境污染有害物质解毒和排泄的作用。它的生长速度快，光合作用效率是一般高等植物的10倍左右，因此有望成为减排C0₂的先锋物种。小球藻要吸收二氧化碳通过光合作用合成有机物,但采用此种方法培养出的藻细胞浓度一般较低。

此外，小球藻在不同培养条件下可以产生10％～30％细胞干重的脂类，可以用于转化为脂肪酸甲脂即生产生物柴油。小球藻具备降解有机污染物，高效吸附重金属和吸收氮磷等功能，在生物能源和环境保护领域具有重要的应用开发前景，是一种极其重要的微藻资源。通常使用SE培养基（SE Medium）和Pr培养基（Pr Medium），也可以使用BG-11培养基(BG-11 Medium)培养。目前，小球藻自养培养的技术已经成熟，但存在的问题是在小球藻细胞增加到一定浓度后阻挡光线进入培养物，因此限制了小球藻的光合作用，导致培养的小球藻生物量低。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于设计提供一种快速培养高油脂小球藻培养液及其培养方法的技术方案，能准确稳定高效的培养出高油脂、高生物量、适应性强的优良株系。

所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于由重量百分含量的以下物质组成：94-98%SE培养基、2-6%木醋液。

所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述SE培养基的含量为95-96%。

所述的一种高油脂小球藻培养液，其特征在于所述木醋液的含量为3-5%。

所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于包括以下步骤：

1）将活化后的小球藻移接到装有94-98%SE培养基、2-6%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；

2）将锥形瓶置于转速150-180 r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为4000-6000Lx, 光暗比为4-6：8-12h进行间隔光照，培养温度控制在15-21℃，在PH值为5-6.6的条件下持续通CO₂培养12-25天，即得高油脂小球藻。

所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2）中摇床的转速为160-170 r/min。

所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2）中光强为4500-5000Lx。

所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2）中采用光照间隙法间隔光照，光暗比为5：10h。

所述的一种高油脂小球藻的培养方法，其特征在于步骤2）中培养温度为18-20℃，在PH值为5.5-6.0的条件下持续通CO₂培养15-20天。

所述的SE培养基（SE Medium），为微藻培养基的一种，可由市场上直接购得。所述的木醋液是木材加工剩余物经高温热解而得到的副产物，可从市场上直接购得。上述小球藻的活化工艺为公知技术，在此不再赘述。

上述一种高油脂小球藻培养液及其培养方法，培养液中添加了能够促进藻类迅速生长、合成油脂的木醋液；其培养方法操作简便，设备投资少，成本低廉，能准确稳定高效的培养出高油脂、高生物量、适应性强的优良株系。本申请文件中涉及的百分含量除另有说明外，其它的均为纯物质的重量百分含量。

具体实施方式

现结合本发明的实施例和培养效果试验，进一步说明本发明的有益效果。

实施例1 

将活化后的小球藻移接到装有98%SE培养基、2%木醋液组成的培养液的锥形瓶中；将锥形瓶置于转速180 r/min的摇床上震荡培养，光照采用白色荧光灯，光强为6000Lx, 光暗比为5：10h进行间隔光照；培养温度控制在21℃，pH=6.6的条件下持续通CO₂培养21天，即得高油脂小球藻。

实施例2