[发明专利]一种核苷酸类似物及其合成和应用

权利要求书

1.一种核苷酸类似物，其特征在于：其具有如下结构式：

结构式中三唑单核苷酸为β-构型；核糖为D-构型；

与三唑单核苷酸相连的R为C₂-C₁₅饱和或不饱和烷基，或含有氧、氮、氯、溴或硫杂原子的C₂-C₁₀饱和或不饱和烷基，以下称之为A；

或R为以下称之为B，其中R₁为羟基、烷氧基、氨基或取代胺基；

或R为以下称之为C，其中R₂为芳基或饱和或不饱和烷基；

或R为以下称之为D，其中R₃为氢、卤素、羟基、烷氧基、氨基、取代胺基氨基、甲基、三氟甲基或芳基。

2.按照权利要求1所述核苷酸类似物，其特征在于：其结构式如下，

3.按照权利要求1所述核苷酸类似物，其特征在于：其结构式如下，

4.按照权利要求1所述核苷酸类似物，其特征在于：其结构式如下，

5.一种权利要求1、2、3或4所述核苷酸类似物的合成方法，其特征在于：以四乙酰核糖为原料，经过四步反应生成含有三唑环的核苷酸类似物，其反应过程如下：

1)按常规方法合成2，3，5-三乙酰-1-叠氮核糖；

2)在含1～10％(体积含量)DMF的磷酸缓冲液(pH 7.0)中，加入步骤1)合成的2，3，5-三乙酰-1-叠氮核糖和脂肪酶(来源于Candida rugosa)，30～37℃反应0.5～1.5小时，乙酸乙酯萃取，浓缩，硅胶柱层析得5-羟基-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖；其中，2，3，5-三乙酰-1-叠氮核糖的初始浓度为0.2～1M，脂肪酶在反应体系中的浓度为1000～8000U/ml，1U为在pH 7.2，30℃每小时催化橄榄油水解产生1μmol脂肪酸所需的酶量。

3)步骤2)合成的5-羟基-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖，溶解于无水四氢呋喃中，0℃下加入三乙胺，再滴加三氯氧磷，室温搅拌24h，加入水，浓缩得到5磷酸-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖；其中，5-羟基-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖的初始浓度为0.1～2M，5-羟基-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖、三乙胺、三氯氧磷的摩尔比为1∶1.2∶1.2，水与四氢呋喃体积比为1∶5～5∶1。

4)步骤3)合成的5-磷酸-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖，在50～90％低碳醇(甲醇、乙醇、丙醇或丁醇)水溶液中，加入炔、硫酸铜和抗坏血酸钠，在10～80℃搅拌反应12～48h，经过硅胶柱层析得到核苷酸类似物；其中，5-磷酸-2，3二乙酰-1-叠氮核糖初始浓度为0.05～0.5M，并且，5-磷酸-2，3-二乙酰-1-叠氮核糖、炔、硫酸铜、抗坏血酸钠的摩尔比为1∶1.1～1.5∶0.1～0.2∶0.2～0.6。

6.按照权利要求5所述核苷酸类似物的合成方法，其特征在于：所述炔为R-C≡CH；

其中R为C₂-C₁₅饱和或不饱和烷基；或含有氧、氮、氯、溴或硫杂原子的C₂-C₁₀饱和或不饱和烷基；或R为其中R₁为羟基、烷氧基、氨基或取代胺基；或R为其中R₂为芳基或饱和或不饱和烷基；或R为其中R₃为氢、卤素、羟基、烷氧基、氨基、取代氨基、甲基、三氟甲基或芳基；或R为稠环芳基。