[发明专利]八月红梨果实可滴定酸含量的分子标记

权利要求书

1.一种‘八月红’梨果实可滴定酸含量的分子标记，是通过下列步骤获得：

a）利用梨品种‘八月红’和‘砀山酥梨’杂交获得F₁后代单株；

b）采用AFLP引物E-AAC：5'- GACTGCGTACCAATTCAAC-3'和M-CAG：5'- GATGAGTCCTGAGTAACAG-3' 以梨基因组DNA为模板进行PCR扩增，扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离，对‘八月红’和‘砀山酥梨’及其杂交后代基因组DNA进行分析，统计分析在亲本间具有多态性的位点在后代群体中的遗传类型，将得到的多态性标记位点导入Joinmap3.0作图软件，构建‘八月红’梨的遗传连锁图谱；

c）对‘八月红’和‘砀山酥梨’杂交后代的F₁群体单株的果实可滴定酸含量进行测定，利用MapQTL5.0作图软件的区间作图法，将F₁群体每个单株的果实可滴定酸含量与‘八月红’梨遗传连锁图谱中的分子标记进行连锁和QTL分析，以LOD值≥2.5为标准，大于2.5说明存在一个QTL位点，检测到在母本‘八月红’的第3连锁群上检测到可滴定酸含量的QTL位点Pta1，其LOD值为3.91，是主效QTL，距离最近的一个分子标记为EAACMCAG-850m*，大小为850 bp，距Pta1的距离为2cM，该标记可以作为梨果实可滴定酸含量的标记。

2.根据权利要求1所述的分子标记，其特征在于：所述QTL位点Pta1位于‘八月红’梨第 3连锁群上，其解释49.3%的可滴定酸含量特征。

3.权利要求1或2所述分子标记在梨分子育种中的应用。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：用梨基因组DNA，采用AFLP引物E-AAC：5'- GACTGCGTACCAATTCAAC-3'和M-CAG：5'- GATGAGTCCTG

AGTAACAG-3'进行PCR扩增，扩增产物在6%变性聚丙烯酰胺凝胶上电泳分离后，如果获得一个分子标记大小为850 bp，则表明梨果实可滴定酸含量的主效QTL位点存在，该QTL位点Pta1位于‘八月红’梨第 3连锁群上，其解释49.3%的可滴定酸含量特征。