[发明专利]一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及动物干细胞的体外增殖、分化、分离，特别涉及一种山羊雄性生殖干细胞的体外分离及培养方法。

背景技术

生殖细胞的发生、增殖、分化的研究是生命科学研究的重要课题之一。在动物繁殖育种中，高产、优质的遗传资源完全依赖于生殖细胞来完成遗传；在人类，由于精子细胞的发生、成熟障碍等引起的不育症更是困扰众多患者的一个现实问题；在基础研究中，精子更是发育生物学研究的最重要研究对象之一；因此生殖细胞的发生、分化的研究，在畜牧业生产和生物医学研究中具有重要的意义。然而高等哺乳动物生殖细胞的发生、转移、分化完全在体内完成，因此很难动态实时地检测和研究其中的分子事件(Hua等，Recent advances in the derivation of germ cells from the embryonic stem cells.Stem Cells and Development，2008，17：399-411)。

干细胞是一类具有自我更新、高度增殖和多向分化潜能的细胞群体。胚胎干细胞(ES细胞或ESCs)是由早期胚胎内细胞团(ICM)或原始生殖细胞(PGCs)分离而来的多能干细胞。由于胚胎干细胞的独特生物学特性，使干细胞在细胞替代治疗、组织器官修复与重建、基因治疗以及发育生物学模型、新药开发和毒理实验等，几乎所有的生命科学和生物医药领域均具有重要的意义。

近年来，一些著名的研究(Sesndel等，Generation of functional multipotent adult stem cells from GPR125⁺ germline progenitors.Nature；2007，449：346-350；Bukovsky等，Generation of pluripotent stem cells from adult human testis.Nature，456，344-349)发现从胚胎期动物生殖嵴的原始生殖细胞或雄性的睾丸可以得到类似于ES细胞的多能性分化潜能的雄性生殖干细胞(mGSCs)。一般认为，这些雄性生殖干细胞(mGSCs)来源于原始生殖细胞(primordial germ cells，PGCs)，终生存在于性分化后的睾丸中，包括性分化后到精子发生过程中，具有自我增殖和分化潜能的细胞总称；不同于精原干细胞(SSCs)，mGSCs可以分化为机体所有的类型细胞，精原干细胞指未分化的A型精原细胞，一般认为其只有向精子分化的潜能(Ko等，2009)。但也有人认为目前生殖干细胞的起源并不清楚(Yu等，Pluripotent stem cell lines.Genes & Dev，2008，22：1987-1997)。