[发明专利]抗肿瘤的组合物及其制备方法有效
申请号: | 201010601060.0 | 申请日: | 2010-12-23 |
公开(公告)号: | CN102151329A | 公开(公告)日: | 2011-08-17 |
发明(设计)人: | 王正华 | 申请(专利权)人: | 浙江千年春生物技术有限公司 |
主分类号: | A61K38/00 | 分类号: | A61K38/00;A61K35/64;A61P35/02 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 313100 浙江省*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 肿瘤 组合 及其 制备 方法 | ||
技术领域
本发明涉及肿瘤治疗领域,尤其涉及一种抗肿瘤组的合物及其制备方法。
背景技术
大头金蝇(Chrysomyia megacephala),别名红头苍蝇,是节肢动物门有颚亚门昆虫纲有翅亚纲双翅目丽蝇科金蝇亚科昆虫的一种。它食物转化率高,生长速度快,繁殖力高,产卵期长,其虫体的蛋白质含量高,饲养条件和养殖设备相对简单,有利于大规模生产。
大头金蝇是一种完全变态的昆虫,生活史包括:卵→幼虫→蛹→成蝇4个阶段。大头金蝇卵为淡黄色,呈香蕉型,长度约一毫米,一克卵大约有7000粒。幼虫呈锥形,前端尖,后端钝圆,有明显的体节,体长为13~16毫米,一克幼虫约有15条,在适宜的温度环境下,成熟幼虫1~2天就可以成蛹,蛹经过5天左右,即可羽化出成虫。成虫体长8~11毫米,金属绿色,身被灰色,复眼红色。
CN101032525A公开了一种从蝇蛆提取分离具有体外抗肿瘤作用的有效组分,该组份从外源物质诱导的蝇蛆中提取、分离获得,具有抑制人原髓细胞白血病HL-60和人肺腺癌A549细胞增殖生长的作用,当受试物浓度为250MG/ML时,外源物质诱导的蝇蛆干粉及其不饱和脂肪酸体外抑制人原髓细胞白血病HL-60增殖生长的效果分别为25.5%与96.2%,抑制人肺腺癌A549细胞增殖生长的效果分别为26.8%与97.0%。该组合物制备方法复杂,疗效欠佳。
发明内容
本发明提供了一种抗肿瘤的组合物,该组合物对种肿瘤细胞均有抑制活性。
一种抗肿瘤的组合物,由氨基酸在NCBI数据库中登录号分别为Gi2148169、Gi 114236、Gi 2148175、Gi 505529的蛋白a、蛋白b、蛋白c以及蛋白d组成。
优选的,所述的组合物重量百分比组成为:蛋白a 5~15%、蛋白b50~70%、蛋白c 15~25%以及蛋白d 1~10%。
更优选的,所述的组合物重量百分比组成为:蛋白a 10~15%、蛋白b60~70%、蛋白c 20~25%以及蛋白d 5~10%。
最优选的,所述的组合物重量百分比组成为:蛋白a 11.82%、蛋白b60.98%、蛋白c 22.07%以及蛋白d 5.13%。
发明还提供了一种上述抗肿瘤组合物的制备方法,包括:
(1)将大头金蝇消毒后驯化2代以上,得到种蝇;
(2)将培养基置于容器内发酵3~5小时,将种蝇放入培养箱内产卵,控制氨气浓度50~200ppm,卵孵化后,控制培养箱内温度26~35℃,氨气浓度500~1000ppm,继续培养24~120小时;
(3)将幼虫洗净后在35~45℃下烘干,粉碎后溶于水中,在1~15℃浸提30~40小时,在10000转/分下离心10分钟,取上清液并进行超滤,去除分子量小于8000KD的组分,即为成品。
优选的,卵孵化前,培养箱内一氧化碳浓度小于30ppm,氧气浓度20~21ppm,二氧化碳浓度3000~6000ppm。
优选的,卵孵化后,培养箱内一氧化碳浓度小于10ppm。
所述的培养基为青蛙肉、家禽肉、家畜肉、家畜内脏和淡水鱼肉中的一种或多种。这些基料易获得,成本低廉。
所述培养基可以选用以下几种配方:
(1)10~60%的淡水鱼肉、20~70%猪内脏和10~50%的青蛙肉;
(2)30~70%的猪内脏和30~70%的青蛙肉;
(3)10~50%的猪肉和10~50%淡水鱼肉及10~50%鸡肉;
(4)20~60%的牛肉和30~70%青蛙肉;
(5)30~70%的羊肉、10~50%淡水鱼肉及20~60%猪内脏。
本发明组合物对多种癌细胞均有抑制作用,制备方法简单,具有较好的市场化前景。
具体实施方式
实施例1 驯化野生大头金蝇
取自自然界的大头金蝇,为避免野生种类的带菌传病之嫌,经过消毒处理后,进行2~3代隔离饲养,然后在接近自然的养蝇房内养殖驯化,经过四代后,种蝇驯化完成,得到种蝇。
如来年不再驯化种蝇,就需要保存种蝇。保种的方法为:在9~10月份秋末时,把蝇蛹后放入密封容器内,置于温度在5~10℃的冷藏室,在该温度下蛹不会死亡也不会孵化,来年室外温度上升到22℃以上时,取出放进蝇房即可孵化。
实施例2 培养幼虫
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