[发明专利]一种麦冬皂苷D的提取方法

说明书

技术领域：

本发明属于天然产物分离领域，尤其涉及一种麦冬皂苷D的提取方法。

背景技术：

麦冬Ophiopogon japonicus(Thunb.)Ker-Gawl.又名沿阶草、书带草、麦门冬，为百合科沿阶草属多年生常绿草本植物，是一味常用于滋阴的中药，始于《神农本草经》，历代本草都有记载。麦冬具有养阴生津，润肺清心。可用于肺燥干咳，虚痨咳嗽，津伤口渴，心烦失眠，内热消渴，肠燥便秘，咽白喉等症。现代研究发现：麦冬含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸等成分，药理实验表明麦冬皂苷类成分具有一定的抗心肌缺血、抗心律失常等作用。

麦冬皂苷D：C₄₄H₇₀O₁₆，属于甾体皂苷类，易溶于乙醇和水，不溶于丙酮、石油醚等非极性溶剂。其对心脑血管系统方面具有显著的作用，如蒋风荣等发表的“麦冬皂苷D对过氧化氢造模的HUVEC保护作用机制研究”，该文献明确了麦冬皂苷D可以稳定线粒体膜电位，减少钙离子内流，增加细胞的活力，对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)有一定的保护作用。因此本发明提供一种麦冬皂苷D的分离方法，为麦冬有效成分的开发奠定基础。

现有文献中提取麦冬皂苷D多是通过回流，萃取和大孔树脂纯化等手段得到麦冬总皂苷，再通过反复柱层析的方法得到麦冬皂苷D。如卢克刚等发表的“川麦冬中麦冬皂苷D对照品的制备”，该文献公开的方法是80％乙醇回流提取，加水稀释后，用乙酸乙酯萃取，萃余液用水饱和正丁醇萃取，萃取液过减压硅胶柱，收集含目标产物的洗脱液再过加压硅胶柱，洗脱液过ODS硅胶柱，最后通过凝胶柱洗脱得麦冬皂苷D，工艺步骤繁多，操作复杂，制备量少且周期长。现有专利“一种治疗慢性支气管炎的中药制剂及制备方法和应用”(专利号：200510069530.2)，该专利以70～90％的乙醇回流提取，浓缩，加水分散后用石油醚萃取，萃余液再用水饱和正丁醇萃取，然后上大孔树脂柱，高醇洗脱液浓缩后上氧化铝柱吸附，用70％乙醇洗脱，最后经高效液相制备色谱梯度分离得到麦冬皂苷D。该方法采用回流提取能耗大，高效液相的处理量小，且样品有损失。现有提取麦冬皂苷D的方法普遍存在着能耗大，工艺步骤多，制备量少的的问题，因此提供一种能耗低、制备量大的麦冬皂苷D的提取方法是很有必要的。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种麦冬皂苷D的提取方法，该方法操作简单，产品含量高。

本发明之所以采用微波提取，是因为微波提取具有选择性，极性较大的分子可以获得较多的微波能，因而采用微波提取可以选择性的提取一些极性成分，微波提取还具有加热均匀，高效清洁的优点；采用高速逆流色谱法分离纯化，因为该分离方法操作简便，同时也避免了样品的损失，与传统分离手段相比，克服了其操作繁琐，分离周期长的缺点，并具有制备量大，产品纯度高的优点。

本发明是采用以下技术方案来实现的：

一种麦冬皂苷D的提取方法，其特征在于包含以下步骤：取麦冬干燥药材粉碎至20～60目，置微波装置中用8～15倍量60～80％的乙醇溶液提取15～30分钟，提取液浓缩至浸膏，加适量水分散后，加入1～3倍量的水饱和正丁醇萃取1～4次，合并萃取液加0.5～1倍量丙酮沉淀，过滤，滤液蒸干得麦冬总皂苷，再采用高速逆流色谱法对其进行分离纯化，以氯仿-甲醇-1％氨水(6～10∶11～15∶5)作为两相溶剂系统，混匀后置分液漏斗中静置分层，取上相为固定相，下相为流动相，将麦冬总皂苷粉末用下相溶解，流出物减压蒸干即得麦冬皂苷D产品。

所述的微波提取是指先将药材和提取液浸泡0.5～5小时，再置于微波装置中辐照提取，设定额定功率为200～1000W，提取温度为60～80℃。

所述的高速逆流色谱法分离，参数设定：色谱仪转速700～1000r/min，流动相流速0.8～3.0ml/min。

本发明的积极效果是：

1)微波提取：选择性的提取极性成分，减少非极性杂质混入，且提取均匀、快速、能耗低；

2)高速逆流色谱法分离：无需使用载体，减少了操作过程中样品的损失，分离效果好，制备量大。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：