[发明专利]一种制备七叶皂苷A的方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一种制备七叶皂苷A的方法，特别是涉及一种应用高速逆流色谱方法制备七叶皂苷A的方法。

背景技术：

七叶皂苷A是娑罗子的有效成分，属于三萜皂苷，分子式C₅₅H₈₆O₂₄，分子量1131.26，溶于氯仿、甲醇、乙醇和乙酸乙酯等，可溶于水，难溶于乙醚、丙酮等，在强碱溶液中容易脱脂水解。七叶皂苷A具有抗炎、抗渗、消肿的功效，广泛用于治疗血液循环障碍和风湿等。

七叶皂苷为混合物，主要有效成分为七叶皂苷A、B、C和D，现有提取多以皂苷形式和钠盐形式提取，其中七叶皂苷A，含量一般在低于50％。提取方法多为有机试剂萃取法和大孔树脂富集法。

现有分离七叶皂苷单体多是硅胶柱和凝胶柱结合制备，方法繁琐，重现性差，制备量较小，专属性低。如“七叶皂苷A、B的制备液相色谱法分离和结构确证”，采用制备液相制备分离，制备量较小。

高速逆流色谱技术)是一种不用任何同态载体的液、液色谱技术，其原理是基于组分在旋转螺旋管内的相对移动而互不混溶的两相溶剂间分布不同而分离，其分离效率和速度可以与HPLC相媲美。HSCCC分离效率高，产品纯度高，不存在载体对样品的吸附和污染，制备量大和溶剂消耗少，操作简单，能从极复杂的混合物中分离出特定的组分。被广泛应用天然产物分离制备中。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种制备七叶皂苷A的专属性方法。该方法可以制得高纯度七叶皂苷A，而且收率高。

为了解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案来实现的：

一种制备七叶皂苷A的方法，其特征在于包括以下步骤：以沉淀法或树脂法制得七叶皂苷(含量不低于90％)为原料，采用高速逆流色谱仪两次分离制备，即得到高纯度七叶皂苷A。

所述第一次制备溶剂系统可选己烷-氯仿-甲醇-水溶液系统，比例3-4∶5-7∶5-8∶2-3。

所述第二次制备溶剂系统可选己烷-乙酸乙酯-甲醇-磷酸水(pH1-3)溶液系统，比例2-3∶3-5∶5-8∶1-4。

本发明采用高速逆流色谱法制备七叶皂苷A，没有可逆吸附，样品无损失，高效快速的分离方法，并且可以量化生产。

本发明采用两次高速逆流色谱分离，是先把皂苷A与皂苷C、D及大部分皂苷B分离，再第二步细分皂苷A、B，这样可以得到高纯度皂苷A。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1

取己烷、氯仿、甲醇、水，按比例3∶5∶8∶2混合，倒入分液漏斗分层，取下相，溶解七叶皂苷样品(皂苷A含量48.5％)，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调整转速800r/min，流动相2ml/min，注入样品分离，收集七叶皂苷A分离液干燥，再配置己烷-乙酸乙酯-甲醇-磷酸水(pH2)溶液系统，按比例3∶5∶5∶2混合，以上相为固定相，下相为流动相，调整转速900r/s，流动相2ml/min，流动相溶解干燥物，注入高速逆流色谱仪分离，收集分离液，干燥得白色粉末七叶皂苷，含量经高相液相检测含量98.6％，收率95％。

实施例2

取己烷、氯仿、甲醇、水，按比例3∶6∶5∶2混合，倒入分液漏斗分层，取下相，溶解七叶皂苷样品(皂苷A含量48.5％)，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调整转速900r/min，流动相2ml/min，注入样品分离，收集七叶皂苷A分离液干燥，再配置己烷-乙酸乙酯-甲醇-磷酸水(pH1)溶液系统，按比例2∶4∶5∶1混合，以上相为固定相，下相为流动相，调整转速900r/s，流动相1ml/min，流动相溶解干燥物，注入高速逆流色谱仪分离，收集分离液，干燥得白色粉末七叶皂苷，含量经高相液相检测含量99.2％，收率93％。

实施例3：

取己烷、氯仿、甲醇、水，按比例4∶7∶5∶3混合，倒入分液漏斗分层，取下相，溶解七叶皂苷样品(皂苷A含量48.5％)，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调整转速850r/min，流动相1ml/min，注入样品分离，收集七叶皂苷A分离液干燥，再配置己烷-乙酸乙酯-甲醇-磷酸水(pH3)溶液系统，按比例3∶5∶8∶4混合，以上相为固定相，下相为流动相，调整转速850r/s，流动相3ml/min，流动相溶解干燥物，注入高速逆流色谱仪分离，收集分离液，干燥得白色粉末七叶皂苷，含量经高相液相检测含量98.2％，收率92％。