[发明专利]一种金线莲的快繁方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种金线莲的快繁方法。

背景技术

金线莲（Anoectochilus. roxburghii (Wall.) Lindl.）自古以来就是民间使用的珍贵药材，对治疗小儿惊风、高热、百日咳等有奇效。现代医学研究认为：野生、栽培或组培的金线莲具有强心、止痛和降血糖等功效，对于高血压、肿瘤有一定的疗效。兼具赏叶、观花之功用，是观赏价值极高的花卉珍品。

金线莲为典型的阴性植物，生长在阴蔽的阔叶林下，肥沃腐殖土中，对空气、温度、光照、积温等生态条件要求严格。由于金线莲属的植物种子不具胚乳，无发芽能力，只有在与真菌共生条件下，才能促使其种子萌发生长，因此金线莲的种子发芽率很低。长期以来，对金线莲的有性繁殖均未取得突破性进展。近年来，随着金线莲赖以生存的自然环境发生了变化，野生资源锐减，加上人为的大量采挖，现已濒临灭绝。

由于组织培养具有环境因子可人工控制，繁殖周期短、速度快，可周年进行生产，节省生产材料，同时还具有保持植物原有优良性状等优势，所以被广泛采用于很多植物种苗的工厂化繁育，取得了巨大的的经济效益。经过多年的组织培养实践，金线莲组培快繁技术日趋成熟，但是在快繁过程中仍存在着一些影响快繁的突出问题：（1）金线莲丛生芽诱导、增殖、幼苗培养与生根所使用的基本培养基（MS）仍需进一步改良。（2）金线莲试管苗移植栽培技术仍然深受传统的人工栽培技术的影响。这势必给金线莲苗健壮生长、快速繁殖、简化栽培管理、降低生产成本等生产技术环节的改良、发展带来一定困难与局限性。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供了一种金线莲的快繁方法。

本发明的金线莲的快繁方法，包括种苗消毒、芽诱导、芽增殖、幼苗培养、根诱导、试管苗移栽，其中所述芽增殖的培养基为：去除肌醇的MS+ ZnSO4·7H₂O

6mg/L+KH₂PO₄180mg/L+6-BA4mg/L+ NAA1mg/L+2%蔗糖；所述幼苗培养的培养基为：去除肌醇的MS+ZnSO₄·7H₂O3mg/L +KH₂PO₄280mg/L+NAA 0.6mg/L+4%蔗糖，pH5-6；所述根诱导的培养基为：

MS+ ZnSO₄·7H₂O 3mg/L+KH₂PO4 280mg/L+IBA0.6mg/L+4%蔗糖+0.2%活性碳；所述试管苗移栽采用流动循环式溶液培养。

所述流动循环式溶液培养的具体步骤如下：

（1）取茎段粗壮，高3~3.5cm的试管苗进行移栽；

（2）移栽前先打开瓶塞炼苗10d，然后将试管苗从培养瓶取出，洗净附着其上的固体培养基后，放入400倍多菌灵稀释液中，消毒5-7min；

（3）将上述消毒后的试管苗固定在泡沫板上，株间距8′8 cm；

（4）向培养槽中注入稀释4倍浓度的MS培养基，pH值5.4~6.5，初始水位达5-6 cm，根据每天蒸发情况，及时补充无菌水；

（5）将固定有试管苗的泡沫板置于培养槽中培养，培养条件：温度20~25℃，湿度75~85%，光照强度2600~800 lx； 

（6）培养30天左右，叶面追施叶面肥，叶面喷雾，以叶面滴水为度，根据金线莲苗的生长情况，适时叶面追肥，时间每隔半个月一次。

针对影响组培快繁中的突出问题，本发明以筛选金线莲诱导、增殖、幼苗培养和根诱导培养基为目的，把简化培养基的成分，优化激素的种类、配比和浓度做为研究的重点，运用正交试验设计和完全随机区组试验设计，达到优化培养、除去肌醇，节约成本的目的。同时突破传统的幼苗土培方式，采用流动循环式溶液培养，克服了土培金线莲土壤水分不易控制、根系不发达、缓苗时间长、幼苗生长慢的缺点，流动循环式溶液培养有利于金线莲生长发育，适合组培苗驯化移栽，其植株生长健壮，叶片较大生长旺盛且为墨绿色，有光泽，最大的叶片宽幅可达2.1cm。由于营养液流动，便于水气交流，营养均衡，特别能促进根部生长，单株平均鲜生高达2.29g，比同期土培重0.37g，从株高、新叶数、发根率、鲜质量等生物量指标来看，都明显优于传统土培栽培方式，而且易于进行人工操作管理。

附图说明

图1为不同栽培方式对移栽组培苗生长的影响。

具体实施方式

1、消毒