[发明专利]髓过氧化物酶测定试剂盒

说明书

技术领域

    本发明涉及一种测定试剂盒，特别是涉及一种髓过氧化物酶测定试剂盒。

背景技术

髓过氧化物酶(myeloperoxidase，MPO)又称过氧化物酶，是过氧化物酶家族中的重要成员,是一种由活化的中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞分泌的白细胞酶，是一种重要的含铁溶酶体，存在于髓系特异性标志，MPO水平与中性粒细胞激活程度之间存在极显著的相关性，是中性粒细胞的活化标志物。现在，国内外生产的髓过氧化物酶试剂盒大量采用了ELISA方法和选择抑制法。其中ELISA法是利用基本的抗原-抗体特异性反应的原理进行检查，但操作过程复杂而且会直接影响检测结果，比如洗板的干净程度将直接影响测定结果，并且该方法无法实现精确定量的目的，测定一个标本需要30分钟～数小时。选择抑制法，因这种试剂盒采用三试剂三步测定的基本原理和计算模式，只能在支持（具有）添加三种或以上试剂同时检测15分钟反应的全自动生化分析仪测定，使用极为复杂和不便，而且试剂中的抑制剂无法保证其对酶活性抑制的特异性和专一性，测定的唯一性有待考究，在实践的过程中发现其精密度较差。

发明内容

本发明的目的在于克服上述缺点，提供一种基于抗原-抗体特异性反应原理，测定时间短，特异性好，精密度高，准确度好，且节约试剂位，可普遍用于各类全自动化分析仪的髓过氧化物酶测定试剂盒。

 本发明髓过氧化物酶测定试剂盒包括两种试剂，其配合比例按重量百分数计是，试剂1:试剂2= 50～90:10～50，其中，

试剂1组分按重量百分数计是：

氯化钠                          1 .00~10.00，

    三羟甲基氨基甲烷缓冲液          0.40~10.00，

    表面活性剂                      0.05~2.00，

    叠氮钠                          0.02~0.20，

    超纯水                          77.80~98.53；

试剂2组分按重量百分数计是：

抗体-纳米微球复合物              0.01~5.00，

 三羟甲基氨基甲烷缓冲液          0.40~10.00，

 表面活性剂                      0.05~2.00，

叠氮钠                          0.02~0.20，

超纯水                          82.8~99.52。

其中，抗体-纳米微球复合物是兔抗人MPO-纳米复合物，鸡抗人MPO-纳米复合物，鸭抗人MPO-纳米复合物，鹅抗人MPO-纳米复合物，羊抗人MPO-纳米复合物，鼠抗人MPO-纳米复合物，马抗人MPO-纳米复合物中的一种。其中，纳米材料的直径中50～5000nm的微球；表面活性剂是吐温-20，曲拉通，EMULGEN120中的一种。使用时，按试剂1:试剂2= 50～90:10～50的比例范围，分别取出试剂1和试剂2，混合后用于测定一份血清标本。

本发明髓过氧化物酶测定试剂盒的优点在于测定时间短，只需要8-10分钟，特异性好，精密度高，准确度好，且节约试剂位，可普遍用于各类全自动化分析仪，测定髓过氧化物酶。使用时将含有髓过氧化物酶或者怀疑含有髓过氧化物酶的血清样品与抗体-纳米微球复合物结合，产生不溶性的抗原-抗体复合物，产生一定浊度。浊度高低反映样品中髓过氧化物酶的含量，通过与同样处理的髓过氧化物酶配套校准品比较，即可计算出样品中髓过氧化物酶的含量。

具体实施方式

实施例1

试剂盒按重量百分数计是试剂1:试剂2=50:50。

其中，试剂1组分按重量百分数计是：

氯化钠                          1.00

        三羟甲基氨基甲烷缓冲液          0.40

        吐温-20                         0.05

        叠氮钠                          0.02

        超纯水                          98.53

将上述成分混合后即得试剂1。