[发明专利]救必应酸衍生物及其在制备抗肿瘤的药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种从天然中药中获得的救必应酸的衍生物制备方法，确切的说是一种以中药提取化学成分为先导化合物，制备一系列衍生物，以抗肿瘤活性为指标进行结构修饰，属于医药领域。

背景技术

救必应酸是从中药救必应(Ilicis routundae cortex)中经提取、纯化、分离、碱降解而获得的一种五环三萜类化合物。我们的研究已经证明了救必应酸具有预防和治疗心脑血管疾病的药理活性(专利公开号：CN101856357A)，同时具有降血脂等药理作用(专利公开号：CN101849950A)。据文献报道一些五环三萜类化合物，如熊果酸、齐墩果酸等也具有较强的抗肿瘤活性(中国民族民间医药，2009年，12期，14-15)，因此，本发明的目的在于对救必应酸化合物进行结构改造，制备一系列衍生物，以期寻找对肿瘤细胞株生长有更强的抑制作用的新的五环三萜类衍生物。根据我国常见肿瘤发病疾病，选择了前列腺癌、肺癌、肝癌、宫颈癌、胃癌等肿瘤细胞，进行抗肿瘤活性实验，从而进行药效学评价。

在本发明完成之前，还没有文献报道救必应酸及救必应酸的衍生物具有抑制肿瘤细胞生长的作用，也未发现救必应酸及救必应酸的衍生物在制备抗肿瘤药物应用的报道。

发明内容

本发明在于提供一种以救必应酸为先导化合物合成一系列具有抗肿瘤作用的救必应衍生物。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现：

一种具有抗肿瘤活性的救必应酸衍生物(具体的取代基结构见表1)，其结构式如下：

其中：R₁为羟基或酰氧基；R₂为羟基或氨基醇

如上所述的一种具有抗肿瘤活性的救必应酸衍生物由以下方法得到：

1、乙醇提取中药救必应(Ilicis routundae cortex)，经纯化、分离、碱降解而获得的化合物1(3β，19α，24-三羟基-乌苏烷型-12-烯-28-羧酸)，即救必应酸。

2、化合物1分别与乙酸酐、丙酸酐或丁二酸酐反应得3β，19α-二酰氧基-24-羟基-乌苏烷型-12-烯-28-羧酸类化合物2-4。

其中R₁为酰氧基

3、化合物2-3与草酰氯在室温下反应，然后在PH为8-9的条件下加氨基醇反应得N(3β，19α-二酰氧基-24-羟基-乌苏烷型-12-烯-28-酰)-氨基醇化合物5-10；

其中R₁为酰氧基，R₂为取代氨基醇

4、化合物5-10在碱溶液中水解得N(3β，19α，24-三羟基-乌苏烷型-12-烯-28-酰)-氨基醇化合物11-13；

R₂为取代氨基醇

表1具体各化合物结构

以上所述的一种具有抗肿瘤活性的救必应酸衍生物，可用于制备治疗肿瘤疾病的药物。

本发明的特点为：对天然产物救必应酸进行化学修饰，得到一系列与救必应酸结构相似的衍生物，经药理实验证明，具有对肿瘤细胞明显的抑制作用，且活性优于母体化合物救必应酸。

救必应酸及衍生物对肿瘤细胞的抑制作用，这些药理作用，通过以下药效学试验例得到证实。

细胞  人宫颈癌细胞(Hela)、人小细胞肺癌(NCI-H446)、人乳腺癌细胞(MCF-7)、人胃癌细胞(SGC-7901)、人肝癌细胞(BEL-7402)、前列腺癌细胞(DU 145)等6种细胞系均购自吉林省肿瘤医院。

药品及试剂  救必应酸及各衍生物为本实验室自制；四甲基偶氮唑盐(MTT)为Sigma公司产品；青霉素G钾盐为Sigma公司产品；硫酸链霉素Sigma公司产品；HEPES为Sigma公司产品；DMSO为Sigma公司产品；胰酶为Difco公司；新生牛血清(FBS)为北京元亨圣马生物技术研究所产品；RPMI-1640培养基为Hyclone公司产品。

仪器  CK2TRC-3荧光倒置显微镜，日本OLYMPUS产品；D-63450-CO₂培养箱，德国Hera公司产品；FCANF129004酶标仪，澳大利亚TECAN公司产品。