[发明专利]一种胰岛素基因修饰的肝干细胞制法及其应用和制剂

权利要求书

1.一种胰岛素基因修饰的肝干细胞制备方法，该方法包括：通过脐带、骨髓或脐带血分离得到肝干细胞，将克隆胰岛素基因的腺病毒修饰肝干细胞得到胰岛素基因修饰的肝干细胞，其特征在于，所述肝干细胞通过以下方法制备，该方法包括：

对肝干细胞进行克隆好的胰岛素基因的腺病毒修饰的步骤，

所述胰岛素基因修饰的肝干细胞通过使肝干细胞与胰岛素基因克隆载体电穿孔完成，所述载体选自由病毒载体、脂质体、质粒和噬菌体所组成的组中。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述肝干细胞与胰岛素基因克隆载体中的比例范围为0.1∶40到40∶0.1，所述电穿孔的时间为0.5h-12h。

3.据权利要求2所述的方法，其中，所述肝干细胞与胰岛素基因克隆载体中的比例范围为1∶5，所述电穿孔的时间为0.5h-5h。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述载体选自由病毒载体、脂质体、质粒和噬菌体所组成的组中。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述载体选腺病毒、慢病毒所组成的组中。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，所述肝干细胞来自由脐带、骨髓、和脐带血所组成的组中。

7.根据权利要求6所述的方法，其中，所述肝干细胞来自骨髓。

8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肝干细胞表达胰岛素，并能在体内体外分化成胰岛β细胞。

9.由权利要求1-18中任意一项所述的方法得到的胰岛素基因修饰的肝干细胞。

10.一种肝干细胞制剂，所述肝干细胞制剂包括肝干细胞，其特征在于，所述肝干细胞为权利要求13所述的胰岛素基因修饰的肝干细胞。

11.根据权利要求10所述的制剂，其中，所述制剂包括1×10⁵到5×10⁷个/mL所述胰岛素基因修饰的肝干细胞。

12.权利要求17所述的胰岛素基因修饰的肝干细胞在治疗糖尿病制剂中的应用。

13.一种制备权利要求12所述的胰岛素基因修饰的肝干细胞的制剂，其特征在于，所述制剂包括：

1)肝干细胞基础培养基；

2)胰岛素基因；

3)胰岛素基因克隆的载体；

4)生理盐水；以及

5)使用说明书；

其中，所述胰岛素基因克隆的载体选自由腺病毒、慢病毒所组成的组中；

所述使用说明书包括权利要求1-12中任意一项所述的方法。