[发明专利]即配即用型的胰蛋白酶制剂

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域；更具体地，本发明涉及即配即用型的胰蛋白酶制剂。

背景技术

胰蛋白酶溶液易自身降解，一般使用之前配制，无菌过滤后，马上使用。但由于胰蛋白酶溶液是细胞消化使用的一个常用的试剂，所以，现在市场上有配制好的胰蛋白酶细胞消化液。

细胞消化液的主要成分为胰蛋白酶，目前市场上的细胞消化液均为溶液，运输及储存均需在低于4℃的条件下进行，如运输及储存不当，极易失活，失活后即丧失消化能力，导致使用时细胞消化的效果不稳定。

并且，目前市场上的胰蛋白酶细胞消化液均以其中含有的胰蛋白酶的重量来计算，而不以其单位活性来计算，因此其用于细胞消化时由于单位活性不清楚而导致无法精确地确定正确的用量。

因此，本领域目前迫切地需要改善胰蛋白酶制剂的配制和使用现状，找到一种更为合适的、准确的胰蛋白酶制剂的配制和使用方法。

发明内容

本发明的目的在于提供一种即配即用型的胰蛋白酶制剂。

在本发明的第一方面，提供一种胰蛋白酶制剂组合，包括：

(1)一胰蛋白酶冻干粉，所述对胰蛋白酶冻干粉由胰蛋白酶液直接冻干或加入甘露醇或海藻糖后冻干制成；和

(2)一溶剂，所述的溶剂中包括：细胞平衡液，以及终浓度为0.001-0.01％(w/v)的EDTA。

在另一优选例中，所述的细胞平衡液中不包括：Ca²⁺，Mg²⁺离子。

在另一优选例中，制备所述的胰蛋白酶冻干粉时，以0.1-10％(w/v)的终浓度加入所述的甘露醇或海藻糖。

在另一优选例中，制备所述的胰蛋白酶冻干粉时，以0.5-6％(w/v)的终浓度加入所述的甘露醇或海藻糖。

在另一优选例中，制备所述的胰蛋白酶冻干粉时，以1-5％(w/v)的终浓度加入所述的甘露醇或海藻糖。

在另一优选例中，所述的溶剂中包括：终浓度为0.003-0.008％(w/v)的EDTA。

在本发明的另一方面，提供所述的胰蛋白酶制剂组合的用途，用于制备酶解或消化细胞的试剂盒。

在本发明的另一方面，提供一种胰蛋白酶冻干粉，所述的胰蛋白酶冻干粉由胰蛋白酶液加入甘露醇或海藻糖后冻干制成。

在另一优选例中，制备所述的胰蛋白酶冻干粉时，以0.5-6％(w/v)的终浓度加入所述的甘露醇或海藻糖。

在另一优选例中，制备所述的胰蛋白酶冻干粉时，以1-5％(w/v)的终浓度加入所述的甘露醇或海藻糖。

在本发明的另一方面，提供一种溶剂，所述的溶剂中包括：细胞平衡液，以及终浓度为0.001-0.01％(w/v)的EDTA。

在另一优选例中，所述的溶剂中包括：终浓度为0.003-0.008％(w/v)的EDTA。

在本发明的另一方面，提供一种用于酶解或消化细胞的溶液，由所述的胰蛋白酶冻干粉和所述的溶剂混合而成。

在另一优选例中，所述的溶液中胰蛋白酶的酶活性为500-15000单位(U)；或

在另一优选例中，所述的胰蛋白酶液的酶活性为1000-12000单位(U)。

在另一优选例中，所述的胰蛋白酶液的酶活性为1000-10000单位(U)。

在另一优选例中，所述的胰蛋白酶液的酶活性为1000-6000单位(U)。

在另一优选例中，所述的胰蛋白酶液的酶活性为1500-3000单位(U)。

在另一优选例中，所述的溶液中EDTA的终浓度为0.001-0.01％(w/v)。

在本发明的另一方面，提供一种酶解或消化细胞的方法，所述方法包括：采用所述的用于酶解或消化细胞的溶液处理需要酶解或消化的细胞。

在本发明的另一方面，提供一种试剂盒，其包括所述的试剂组合。

在另一优选例中，所述的试剂盒中还包括使用说明书。

本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。

附图说明

图1显示了采用本发明的酶蛋白制剂消化细胞的结果。其中，

I.消化1～2min，细胞间隙增大，细胞变形，加入培养基，终止消化。

II.细胞经悬浮后，基本呈单个细胞状态，无成团现象。

III.细胞经贴壁生长2d后，基本单个生长，无成团现象。

具体实施方式