[发明专利]三聚氰胺快速现场检测试剂及检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及食品及饲料安全监测中三聚氰胺的快速定性检测技术，特别涉及一种乳粉、蛋白粉、动物饲料和液体乳制品中三聚氰胺快速现场检测试剂及检测方法。

背景技术

三聚氰胺(Mel)是一种用途广泛的具有氮杂环结构的有机化工原料，因其结构中不仅有氮杂环且含有多个氨基氮，使其含氮量高达66％以上，因此Mel被一些不法商贩添加到商品中以虚高商品蛋白含量。2007年美国发生的猫狗宠物非正常死亡事件以及2008年国内的奶粉事件都由此造成。

目前，检测Mel的主要方法是高压液相色谱法、液质联用和气质联用等，不仅对仪器、操作人员素质及实验室要求都很高，检测费时且运行费用高，也难以满足现代食品安全现场监测对检测方法简单、快速、便携的要求。

自从2008年国家征集Mel快速监测方法以来，有数十个Mel检测专利技术问世，其中大部分是采用免疫学原理而研发的ELISA试剂盒，检测特异性强，敏感度相对高，但试剂盒制备中涉及Mel完全抗原的制备、动物免疫、Mel与酶的交联等复杂程序，试剂成本价格高。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种对奶粉、蛋白粉、饲料以及酸奶、鲜乳等样品中Mel进行简单、快速的定性检测、价格低廉、适宜于非专业人员操作的便携式三聚氰胺快速现场检测试剂。

本发明的第二个目的在于提供一种采用该检测试剂进行三聚氰胺快速现场检测的方法。

为达到上述目的，本发明三聚氰胺快速现场检测试剂包括三聚氰胺提取剂和三聚氰胺指示剂，所述提取剂由20-25g/100mL的三氯乙酸水溶液与AlCl₃、ZnCl₂或MgCl₂混合而成，三聚氰胺提取剂中Al、Zn或Mg的离子浓度为10-30mmol/L，所述三聚氰胺指示剂为CuCl₂的饱和水溶液。

本发明的检测方法包括如下步骤：

1)提取剂制备：向20-25g/100mL的三氯乙酸水溶液中加入AlCl₃、ZnCl₂或MgCl₂得提取剂，提取剂中Al、Zn或Mg的离子浓度为10-30mmol/L；

2)指示剂制备：配制CuCl₂的饱和水溶液作为指示剂；

3)提取：将液态试样与提取剂按3-4∶1的体积比充分混合得提取液，去除提取液中的沉淀得待检测液；

4)检测和结果判读：将指示剂与待检测液按1∶20的体积比混匀，若混匀后的溶液为天蓝色浑浊液，则说明试样中含有三聚氰胺，浊度越高则含量越大，含量低于30mg/kg的待检测液则为清澈透亮的天蓝色溶液。

所述液态试样包括液态样品以及35-50g/100mL的固态样品水溶液。

所述提取液中沉淀的去除方法为：将提取液超声处理2分钟，然后于4000g离心力下离心3-5分钟；或者用经过4-5倍稀释的提取剂润湿滤纸，然后用润湿的滤纸过滤提取液。

本发明的有益效果体现在：

1)与国标检测方法相比，本发明的检测原理不同于色普分析，对设备要求低耗资少，而且大大提高检测效率，节省劳动量。国标法(高压液相色谱法等)除过需要昂贵的设备和专业的操作人员外，过程步骤复杂，一个样品检测需数小时才能完成；本检测方法无需设备，检测试剂廉价、简单，而且检测时间缩短到10-20分钟，满足科技部对快速检测方法的时间(30分钟)要求。

2)本检测方法可组装成试剂盒，检测方便快捷。由于检测试剂简单、检测组件体积小巧，依此组装的试剂盒小巧便携；检测方法简单；沉淀反应快速，适合于现场快速报告；结果鲜明便于目测辨别，使用极其方便简单，大大简化了检测程序。满足当前食品安全检测对检测方法“简单、快速、便携”的要求，适合于现场筛查和监督。

3)本检测方法灵敏度不高于3mg/100mL或30mg/kg。，满足一般检测要求，可以作为国标检测的辅助手段。凡使用此法检测结果为阳性者，均可肯定三聚氰胺掺假，无需再用高精仪器检测。这样便可大大减轻工作量，减少耗资并缩短检测时间，提高检测效率。

4)检测对象的范围广，市场范围宽，可以提供给食品安全监管相关部门用于劣质产品筛查。

附图说明

图1为不同金属水溶液与三聚氰胺的定性反应；

图2为三聚氰胺分子式；

图3为Cu(II)与三聚氰胺分子间的配合体平面结构；

图4为不同含量MEL掺假鲜乳的检测结果；

图5为不同含量MEL掺假玉米面的检测结果；

图6为MEL掺假酸牛乳的检测结果；