[发明专利]一种启动子BgIosP581、制备方法及应用有效
申请号: | 201010616659.1 | 申请日: | 2010-12-30 |
公开(公告)号: | CN102146399A | 公开(公告)日: | 2011-08-10 |
发明(设计)人: | 张耕耘;费小红;张卫;黄刚 | 申请(专利权)人: | 深圳华大基因科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N15/63;C12N1/21;C12N5/10;C12N15/11;C12N15/10;A01H4/00;A01H5/00;C12R1/19;C12R1/01 |
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地址: | 518083 广东省深圳市盐田*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 启动子 bgiosp581 制备 方法 应用 | ||
1.一种启动子,所述启动子含有选自以下任意一组并具有启动子功能的核苷酸序列:
a、Seq ID No.1所示的核苷酸序列;
b、与Seq ID No.1互补的核苷酸序列;
c、在高等严紧条件下能够与上述a或b的核苷酸序列杂交的核苷酸序列;
d、对上述a或b所示核苷酸序列进行一个或多个碱基的取代、缺失、添加修饰的核苷酸序列;
e、与上述a或b所示核苷酸序列具有至少90%同一性的核苷酸序列。
2.一种核酸构建体,包含权利要求1所述的启动子,与启动子可操作连接的基因序列,其中所述启动子与所述基因序列来源相同或者不同。
3.一种载体,其特征在于:所述载体含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体,优选的,所述载体为权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体与pMD18-T或p8质粒经重组得到的重组载体。
4.一种重组细胞,其特征在于:所述细胞含有权利要求1所述的启动子或权利要求2所述的核酸构建体或权利要求3所述的载体,优选的,所述重组细胞为重组大肠杆菌细胞或重组农杆菌细胞。
5.一种含有权利要求1的启动子或权利要求2的核酸构建体或权利要求3的载体或权利要求4的重组细胞的植物愈伤组织或植物外植体或植物,优选的,所述植物为单子叶植物或双子叶植物,再优选的,所述植物为稻属或烟草属,更优选的,所述植物为水稻或烟草,进一步优选的,所述植物为水稻日本晴或烟草NC89。
6.一组引物对,所述引物对用于扩增得到权利要求1所述的启动子,其特征在于:所述引物对的两条引物分别含有Seq ID No:2和Seq ID No:3所示的序列,优选的,所述引物对的两条引物在5’端还分别连接有限制性酶切位点和/或保护碱基,更优选的,所述引物对的两条引物分别具有Seq ID No:4和SeqID No:5所示的序列。
7.制备SEQ ID NO:1所示的启动子的方法,包括
以水稻日本晴基因组DNA为模板,使用一对扩增引物进行扩增,所述扩增引物根据SEQ ID NO:1在水稻日本晴gDNA中的序列分别针对首尾进行设计,优选是权利要求6所述的引物对。
8.一种调控植物中基因表达的方法,所述方法包括,将权利要求1所述的启动子或权利要求2的核酸构建体或权利要求3的载体或权利要求4的重组细胞导入植物,优选导入植物愈伤组织,
优选的,所述植物为单子叶植物或双子叶植物,
再优选的,所述植物为稻属或烟草属,
更优选的,所述植物为水稻或烟草,
进一步优选的,所述植物为水稻日本晴或烟草NC89。
9.一种制备转基因植物的方法,包括在有效产生植物的条件下培养权利要求4的重组细胞或权利要求5的植物愈伤组织或植物外植体或植物。
10.权利要求1所述的启动子或权利要求2的核酸构建体或者权利要求3的载体或权利要求4的重组细胞或权利要求5的植物愈伤组织或植物外植体或植物在调控植物中目的基因表达或植物育种中的用途,植物优选是单子叶植物或双子叶植物,再优选为稻属或烟草属,更优选为水稻或烟草,更进一步优选为水稻日本睛或烟草NC89。
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