[发明专利]肿瘤血管靶向多肽与组织因子的融合蛋白及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及重组融合蛋白的表达与纯化，特别涉及肿瘤血管靶向多肽与组织因子的融合蛋白及其制备方法。

背景技术

神经菌毛素1(Neuropilin-1，简称NRP1)是细胞表面的I型跨膜糖蛋白，其相对分子质量为130KDa，由位于染色体10p12的基因编码。NRP1是血管生长因子165(Vascularendothelial growth factor，VEGF₁₆₅)的共受体，VEGF₁₆₅在血管生成中起着重要作用，能够诱导血管的增生。这种作用由血管生长因子受体-2(VEGF receptors 2，VEGFR-2)介导，并且依赖NRP1双倍体的存在，只有双倍体能够使VEGF₁₆₅有效的与VEGFR-2结合(1、WestDC，Rees CG，Duchesne L，Patey SJ，Terry CJ，Turnbull JE，Delehedde M，Heegaard CW，Allain F，Vanpouille C，Ron D，Fernig DG.Interactions of multiple heparin binding growth factors withneuropilin-1 and potentiation of the activity of fibroblast growth factor-2[J].J B iol Chem，2005，280：13457-13464.)。NRP1的双倍体和VEGFR-2形成复合物，能显著增加VEGFR-2的活性，促进VEGF₁₆₅与VEGFR-2的结合。

Haiyan Jia等(2、Haiyan Jia，Azadeh Bagherzadeh，Basil Hartzoulakis，Ashley Jarvis，Marianne Lo¨hr，Shaheda Shaikh，Rehan Aqil，Lili Cheng，Michelle Tickner，Diego Esposito，Richard Harris，Paul C.Driscoll，David L.Selwood，and Ian C.Zachary.Characterization of abicyclic peptide Neuropilin-1(NP-1)antagonist(EG3287)reveals importance of vascularendothelial growth factor exon8 for NP-1binding and role of NP-1in KDR signaling.Journal ofbiological chemistry，2006，281(19)：13493-13502.)基于VEGF₁₆₅与NRP1结合的核心区域设计出短肽EG3287，其研究表明，EG3287可以很好地抑制VEGF₁₆₅与表达NRP1的猪动脉内皮细胞(PAE/NP-1)，抑制率＞95％，说明EG3287与NRP1有较强的亲和力。