[发明专利]一种检测微藻含油量的方法

权利要求书

1.一种检测微藻含油量的方法，其特征在于：

1)取进行微藻培养的藻液，计算藻液中微藻细胞的数量浓度C(个cell/ml)；

2)微藻油脂观察：采用BODIPY 505/515染色荧光记录法；染料使用液浓度为1～2mM，染色1～2min后，使用激发波长488nm激发光，在荧光显微镜下观察并拍照记录单细胞油脂积累变化情况；

根据照片记录单细胞油滴颗粒数目(n)，并测定油滴直径(d)，按照球体积公式计算每个油滴体积，每个细胞油脂含量为所有油滴体积的加和；

根据微藻数量浓度C和单个细胞油脂含量计算单位体积藻液油脂含量：V_t＝CV，C为扁藻细胞浓度，V为单细胞油脂体积，V_t单位体积油脂含量。

2.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

使用有机溶剂二甲亚砜溶解BODIPY 505/515染料并配制成10～20mM的母液。

3.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

细胞计数法计算微藻细胞的数量；采用鲁哥氏液固定微藻的方法；在光学显微镜下利用血球计数仪记录各个时期微藻的细胞数目进而计算藻液浓度。

4.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

藻细胞染色后在488nm激发波长下，使用激光扫描共聚焦显微镜每隔0.01-0.5μm对藻细胞断层扫描并拍照记录，后经3D图像合成软件重建油滴3D图片，表明油滴近似正球体；采用显微镜照相软件测定油滴颗粒直径。

5.按照权利要求1所述的方法，其特征在于：

1)以藻液中微藻细胞的培养时间为横坐标，以藻液中微藻细胞的数量浓度C为纵坐标，建立微藻生长动力学曲线；

2)根据微藻生长曲线和不同时期单细胞油脂体积，按权利要求1所述方法计算各个培养时期单位体积藻液油脂含量V_t的变化。