[发明专利]一种丹酚酸A的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药、保健食品领域，具体涉及一种丹酚酸A的制备方法。

背景技术

【丹参水溶性有效成分-丹酚酸研究进展，基础医学与临床，杜冠华2000，20(5)：10～14.】报道丹酚酸是丹参水溶性成分中最重要的活性成分，丹酚酸A是酚酸类化合物，见(【丹酚酸A抗四氯化碳中毒致大鼠肝损伤和肝纤维化的作用，中药药理学报，胡义杨1997，18(5)：478-480.】)，但是其在丹参中的含量较低(百万分之五左右，甚至没有，【中草药现代研究(第二卷)中国医学科学院药物研究所编著2005，P479-496.】)，即使通过一系列的方法将其提取出来，也只能得到微量的丹酚酸A，因此存在生产成本高，无法进行工业化生产的难题，限制了人们更好地开发利用。很多医药工作者希望将丹酚酸A进行工业化生产，进而开发为医药制剂，但鉴于丹酚酸A来源以及其稳定性原因至今还不能解决其实际生产问题。

现有技术公开了多种丹酚酸A提取纯化的工艺方法，如表1所示方法，这些方法都是从药材进行提取，但是丹酚酸A在药材中的含量很低，加上工艺步骤复杂，成分损失大，无法满足工业化生产丹酚酸A的需求。

表1.现有技术中丹酚酸A的制备方法比较

近几年来的专利或申请(CN1830947A、CN101230003、CN100999470A等)涉及到经过高温高压热解反应，进而再通过常规的分离纯化技术制备丹酚酸A，但是由于起始原料均是丹参水或醇提取物，成分复杂，采用热降解法所得反应液更加复杂，造成后续产物分离极其困难，使得丹酚酸A收率极低，无法满足工业化需求。

本发明人经过大量的实验研究，提供了一种以丹参多酚酸盐(国药准字Z20050246)为原料制备丹酚酸的方法，该方法收率高，能够满足工业化生产。

发明内容

本发明提供了一种丹酚酸A转化液的制备方法，其特征为：以丹参多酚酸盐为原料，加水溶解，调pH值至4.0-6.0，在120-130℃，0.12-0.20MPa下反应4-5小时，溶液冷却后，加酸调PH值至2-3。优选方法为用柠檬酸三钠调节pH至4.0-6.0，调pH值至2-3的酸选自醋酸、盐酸或磷酸。

本发明提供的丹酚酸A转化液的更优选制备方法为：将丹参多酚酸盐加水稀释至浓度为1％，以丹参乙酸镁计，用柠檬酸三钠调pH至6.0，于125℃、0.15MPa条件下转化4小时，冷却至室温后盐酸调pH至2.0～3.0。

本发明提供的丹酚酸A转化液的更优选方法为加入保护剂，保护剂选自乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯中的一种或几种。

本发明提供的丹酚酸A转化液的进一步优选方法为：将丹参多酚酸盐加水稀释至浓度为1％，以丹参乙酸镁计，用柠檬酸三钠调pH至6.0，加入乙酸乙酯，于125℃、0.15MPa条件下转化4小时，冷却至室温后盐酸调pH至2.0～3.0。

本发明提供了一种丹酚酸A的制备方法，其特征在于将上述任一所述方法得到的丹酚酸A转化液依次进行非极性或弱极性大孔树脂柱层析、萃取和硅胶层析。其中非极性或弱极性大孔树脂选自HPD-100、HPD-826、ADS-8或CG161中的一种或几种，萃取中的有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲基叔丁基醚或乙醚中的一种或几种。大孔树脂的洗脱液为水和乙醇溶液，其中乙醇溶液的浓度范围为20-40％，硅胶柱的洗脱液为正己烷-乙酸乙酯。

本发明提供了一种优选的丹酚酸A的制备方法，其特征在于将上述任一所述方法得到的丹酚酸A转化液过HPD100树脂柱，依次用水、25％乙醇溶液洗脱杂质，弃去，再用40％乙醇溶液洗脱收集丹酚酸A洗脱液1，减压浓缩至丹酚酸A浓度约25mg/ml；浓缩液过CG161树脂柱，依次用20％乙醇溶液洗脱杂质，弃去，再用35％乙醇溶液洗脱收集丹酚酸A洗脱液2，减压浓缩至丹酚酸A浓度约50mg/ml；盐酸调pH至2～3，以等体积乙酸乙酯萃取三次，合并萃取液，减压浓缩，加2.5倍量硅胶(80～120目)拌匀，干燥，湿法上硅胶柱200～300目，2.5倍量，以正己烷-乙酸乙酯6∶4和5∶5洗脱，收集正己烷-乙酸乙酯5∶5洗脱液，减压浓缩至干，加水适量分散，再减压浓缩，干燥，得丹酚酸A。其中丹酚酸A的纯度大于95.0％。

采用本发明方法得到的丹酚酸A的转化率比已有中国专利(200710001055.4)公开的转化方法提高了近3倍，然后再通过大孔树脂柱层析、萃取、硅胶柱，得到了可工业化生产的丹酚酸A，且该丹酚酸A纯度高，保证了用药的安全性。