[发明专利]一种启动子BgIosP534及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种启动子，所述启动子含有选自以下任意一组并具有启动子功能的核苷酸序列：

a、SEQ ID NO：1所示的核苷酸序列；

b、与SEQ ID NO：1互补的核苷酸序列；

c、在高等严紧条件下能够与上述a或b的核苷酸序列杂交的核苷酸序列；

d、对上述a或b所示核苷酸序列进行一个或多个碱基的置换、缺失、添加修饰的核苷酸序列；

e、与上述a或b所示核苷酸序列具有至少90％同一性的核苷酸序列。

2.一种核酸构建体，包含权利要求1所述的启动子，以及与启动子可操作连接的基因序列，其中所述启动子与所述基因序列来源相同或者不同。

3.一种载体，含有权利要求1的启动子或权利要求2的核酸构建体，例如含有权利要求1的启动子或权利要求2的核酸构建体的pMD18-T质粒或p8质粒。

4.一种重组细胞，含有权利要求1的启动子、权利要求2的核酸构建体或权利要求3的载体，所述重组细胞例如为重组大肠杆菌细胞或重组农杆菌细胞。

5.一种含有权利要求1的启动子、权利要求2的核酸构建体、权利要求3的载体或权利要求4的重组细胞的植物愈伤组织、植物外植体或植物，所述植物可以为单子叶植物或双子叶植物，优选稻属或烟草属，更优选水稻或烟草，最优选水稻日本晴或烟草NC89。

6.一组引物对，所述引物对用于扩增得到权利要求1所述的启动子，其特征在于：所述引物对的两条引物分别含有SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的序列，优选地，所述引物对的两条引物在5’端还分别连接有限制性酶切位点和/或保护碱基，更优选地，所述引物对的两条引物分别具有SEQ ID NO：4和SEQ ID NO：5所示的序列。

7.制备SEQ ID NO：1所示的启动子的方法，包括：以水稻日本晴基因组DNA为模板，使用一对扩增引物进行扩增，所述扩增引物根据SEQ ID NO：1在水稻日本晴gDNA中的序列分别针对首尾进行设计，优选是权利要求6所述的引物对。

8.一种调控基因表达方法，所述方法包括步骤：

将权利要求1的启动子、权利要求2的核酸构建体、权利要求3的载体或权利要求4的重组细胞转化至植物(优选植物愈伤组织或植物外植体)，使所述核苷酸序列位于所述基因的5’端，所述植物可以是单子叶植物或双子叶植物，优选稻属或烟草属，更优选水稻或烟草，最优选水稻日本晴或烟草NC89。

9.一种制备转基因植物的方法，包括在有效产生植物的条件下培养权利要求4的重组细胞或权利要求5的植物愈伤组织、植物外植体或植物。所述植物可以为单子叶植物或双子叶植物，优选稻属或烟草属，更优选水稻或烟草，最优选水稻日本晴或烟草NC89。

10.权利要求1的启动子、权利要求2的核酸构建体、权利要求3的载体、权利要求4的重组细胞或者权利要求5的植物愈伤组织、植物外植体或植物者用于调控植物目的基因表达和植物育种的用途，所述植物可以为单子叶植物或双子叶植物，优选稻属或烟草属，更优选水稻或烟草，最优选水稻日本晴或烟草NC89。