[实用新型]一步检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种一步检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条。

背景技术

鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis，DVH)简称鸭肝炎，是由鸭病毒性肝炎病毒引起的一种急性接触传染性疾病，以急性发病、病程短和高死亡率为特征。该病在我国多个地区已多次爆发，且发病严重，流行区域广，损失巨大，严重威胁着我国的养鸭业。鸭肝炎可由三种不同类型的病毒引起，称为I型、II型和III型鸭肝炎病毒。在我国据一些研究单位报道，国内流行的鸭肝炎病原主要为I型鸭病毒性肝炎病毒，因此，建立I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条有现实意义。

胶体金免疫层析技术是20世纪80年代发展起来的一项新技术，具有简便、快速、准确、费用低的特点，且由于为干试条形式，无需低温保存，储运也方便，但是目前尚未见有检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条。

发明内容

本实用新型的目的是提供一种一步检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条，它能满足现有技术的上述需求。

一种一步检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条，其特征在于有一底衬、该底衬上面的中部粘帖一包被膜，该包被膜中部有一条包被鸭病毒性肝炎病毒vp1蛋白抗体的检测线和一条包被抗鼠IgG抗体的控制线，包被膜的上面左右分别粘帖一涂覆金标抗体的玻璃纤维膜和吸水纸；涂覆金标抗体的玻璃纤维膜上面粘贴一样品垫。

本实用新型利用现代国际最先进的胶体金免疫层析技术，提供一种现地农户、基层自测等用的检测鸭病毒性肝炎病毒的胶体金试纸条，该试纸条具有特异性强、灵敏度高、检测速度快等优点，且不需使用仪器设备，成本低廉，操作简便。

附图说明

附图为本实用新型的纵剖结构示意图。

具体实施方式

本实用新型一步检测I型鸭病毒性肝炎病毒的试纸条，如图所示，有一底衬1，该底衬1上面的中部粘帖一包被膜4，该包被膜4中部有一条包被鸭病毒性肝炎病毒vp1蛋白抗体的检测线6和一条包被抗鼠IgG抗体的控制线7，包被膜4的上面左右分别粘帖一涂覆金标抗体的玻璃纤维膜3和吸水纸5；涂覆金标抗体的玻璃纤维膜3上面粘贴一样品垫2。

制造本实用新型的步骤如下：

根据I型鸭病毒性肝炎病毒vp1序列构建表达载体，诱导产生vp1蛋白的包涵体，破碎纯化，获得高纯度的鸭病毒性肝炎病毒vp1蛋白，免疫BALB/C小鼠，取其脾细胞与SP2/0细胞融合建立瘤细胞株，进行筛选，取瘤细胞注射于BALB/C小鼠腹腔，使其产生腹水。提取小鼠腹水进行纯化筛选，获得能与产生中和反应的单克隆抗体用于胶体金标记。

制备包被膜4时，将0.05M、pH9.6的碳酸盐缓冲液(PBS)用0.22u膜过滤，制成包被缓冲液。另将20g牛血清白蛋白(BSA)和20g脱脂奶溶于1000ml0.01M、pH7.0的PBS用0.22u膜过滤，制成封闭工作液。调试喷膜机，用上述包被缓冲液稀释鸭病毒性肝炎病毒vp1蛋白的单克隆抗体和抗鼠IgG多克隆抗体，分别在硝酸纤维膜中部上划线，两线间隔5mm，应细致均匀，室温晾干20分钟，该两线用的液体分别渗入硝酸纤维膜中，即分别为检测线6和控制线7。用上述封闭工作液将硝酸纤维膜于37℃封闭60分钟，取出后置于37℃烘干处理两小时，制成包被膜4。