[实用新型]一种同步检测血清样本中多种抗体的蛋白悬浮芯片及系统

说明书

技术领域

本实用新型涉及一种同步检测血清样本中西尼罗抗体、土拉抗体、登革热抗体、禽流感抗体的蛋白悬浮芯片系统。

背景技术

西尼罗热是由西尼罗病毒感染引起的急性传染病。人感染西尼罗病毒多数表现为隐性感染，约140～300个感染者中有1个临床病例。其症状为突然发热、头痛、背痛、肌肉痛等。发烧可表现为双波热，约半数病人可见皮疹。出疹时间在发热期或发热末期。皮疹可为玫瑰样疹或斑丘疹，部位主要在颈背和上肢，持续时间约为1周。可见咽炎和恶心、呕吐、腹泻、腹痛等胃肠道症状。病程一般为3～6天，然后迅速恢复，预后良好，少数病人特别是老年人可表现为无菌性脑膜炎或脑膜脑炎，伴有颈强直、呕吐、神志不安、嗜睡、四肢发抖、痉挛、局部麻痹和昏迷等，病死率较高，达5～12％。

土拉菌病是由土拉弗朗西斯菌引起的多种野生动物、家畜及人共患病，亦称野兔热。临床上以体温升高、淋巴结肿大、脾和其他内脏坏死为特征，土拉菌可以被用作生物战中的致病病菌，感染者会出现高烧、浑身疼痛、腺体肿大和咽食困难等症状。

登革热是登革热病毒引起、依蚊传播的一种急性传染病。临床特征为起病急骤，高热，全身肌肉、骨髓及关节痛，极度疲乏，部分患可有皮疹、出血倾向和淋巴结肿大。

禽流感是由禽流感病毒引起的一种急性传染病，也能感染人类，人感染后的症状主要表现为高热、咳嗽、流涕、肌痛等，多数伴有严重的肺炎，严重者心、肾等多种脏器衰竭导致死亡，病死率很高，通常人感染禽流感死亡率约为百分之33。此病可通过消化道、呼吸道、皮肤损伤和眼结膜等多种途径传播，区域间的人员和车辆往来是传播本病的重要途径。

免疫学方法酶联免疫实验(ELISA)中利用抗原与抗体特异性反应来检测抗原或抗体主要有由双抗原夹心测抗体、双抗体夹心测抗原、竞争法、间接法等。间接法测抗体的原理是特异性抗原结合到固相载体上，然后和待检血清中的相应抗体结合形成免疫复合物，洗涤后再加酶标记二抗与免疫复合物中的抗体结合形成酶标记二抗-抗体-固相抗原复合物，加底物显色，判断抗体含量。

悬浮芯片(suspension array)也称液相芯片，是20世纪70年代美国Luminex公司研制出的新一代生物芯片技术，利用带编码的微球体作为载体，流式细胞仪作为检测平台，对核酸、蛋白质等生物分子进行大规模测定。目前，该技术已广泛应用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、抗体筛选及受体与配体的识别分析等领域。

目前发展的悬浮芯片主要是基于实验室检测方法的建立和方法评价及优化，以缩短检测时间，降低检测成本。但是悬浮芯片方法是否能够同步检测人血清中的西尼罗抗体、土拉抗体、登革热抗体、禽流感抗体，其定量检测能力如何，尚缺乏模型和评价。

实用新型内容

本实用新型的目的在于提供一种同步检测血清样本中多种抗体的蛋白悬浮芯片系统，该芯片系统包括：芯片基体、加液系统、悬浮芯片检测仪和计算机，其中，芯片基体内装有相关缓冲溶液和待测抗体，相关缓冲液中设置有若干种编码微球，各种编码微球上分别包被有相应的捕获抗原，加液系统依次向芯片基体中加入生物素标记的二抗和/或SPA、荧光信号检测物，悬浮芯片检测仪包括微细管检测通道和检测激光，反应后的溶液吸入到微细管检测通道中，以使得每个编码微球依次通过微细管检测通道，检测激光激发并识别编码微球的颜色及其上待测物的荧光信号，计算机与悬浮芯片检测仪相连，并记录、分析悬浮芯片检测仪的测量结果。

进一步，所述相关缓冲溶液包括用于所述待测抗体稀释的样品稀释液、稀释所述编码微球所用的微球稀释液、稀释所述生物素标记的二抗和/或SPA所用的抗体稀释液、每个反应之后洗涤编码微球所用的微球清洗液、SA-PE稀释液、检测缓冲液。

进一步，所述编码微球包括025号编码微球、028号编码微球、031号编码微球、032号编码微球，其中西尼罗E蛋白抗原作为捕获抗原来包被025编码微球、用土拉fopA蛋白抗原作为捕获抗原来包被028号编码微球、用登革热E2蛋白抗原作为捕获抗原来包被031号编码微球、用禽流感H5蛋白抗原作为捕获抗原来包被032号编码微球。

进一步，所述待测抗体为血清样品。

进一步，所述生物素标记的二抗和/或SPA优选为Biotin-羊抗兔和/或Biotin-SPA。

进一步，所述荧光信号检测物为链亲和素-藻红蛋白。

进一步，所述芯片基体为96孔滤板或者微量离心管。

进一步，所述检测激光包括用激发所述编码微球基质中的颜色、识别编码微球分类编码以确定检测项目的红色激光，用于激发并识别待测分子的颜色信号、记录信号强弱以检测所述待测抗体的含量的绿色激光。