[发明专利]用于分离细菌的方法无效
申请号: | 201080004921.5 | 申请日: | 2010-01-18 |
公开(公告)号: | CN102282248A | 公开(公告)日: | 2011-12-14 |
发明(设计)人: | 让-保罗·莱奥内蒂;斯特凡尼·泰克谢尔 | 申请(专利权)人: | 德诺芙公司;法国国家科学研究中心 |
主分类号: | C12N1/00 | 分类号: | C12N1/00 |
代理公司: | 中原信达知识产权代理有限责任公司 11219 | 代理人: | 张颖;樊卫民 |
地址: | 法国*** | 国省代码: | 法国;FR |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 分离 细菌 方法 | ||
1.一种鉴定或分离产生代谢产物的细菌的方法,该方法包括:
a)提供包含未表征细菌的样品;
b)对所述样品进行反复的辐射处理;
c)从所述经处理样品中鉴定或分离活的或者正在生长的细菌;以及
d)选择步骤c)中产生代谢产物的细菌。
2.权利要求1的方法,其中所述样品是环境样品或者来自环境样品,优选获自或来自土壤、水、温泉、海洋环境、淤泥、木材、石块、苔藓、植物提取物、地衣、生物材料、沉积物、泥炭地、生物膜、工业废水、气体、沙子、油、污水、动物或人排泄物。
3.权利要求1或2的方法,其中所述反复辐射处理是将大肠杆菌培养物中的细菌滴度降低至少2个对数级的处理。
4.权利要求1至3中任一项的方法,其中所述处理包括反复的辐射,所述辐射选自紫外线、γ射线和/或X射线辐射,单独地或者组合进行辐射,最优选反复的紫外线辐射。
5.权利要求1至4中任一项的方法,其中所述处理包括反复辐射,间隔为1至8小时之间、优选为3至5小时之间、最优选为约4小时。
6.权利要求4或5的方法,其中所述处理包括以1至8小时的间隔,对所述样品进行至少2次优选至少3次的紫外线处理,每次紫外线处理在0.5至400mJ/cm2之间、优选在1至200mJ/cm2之间、通常在1至100mJ/cm2之间。
7.权利要求1至6任一项的方法,还包括选择奇异球菌的步骤。
8.前述权利要求中任一项的方法,其中步骤b)在固体培养基中进行。
9.前述权利要求中任一项的方法,其中在步骤c)中鉴定或分离菌落。
10.前述权利要求中任一项的方法,其中步骤c)和d)是以任意顺序顺序地进行、或者同时进行。
11.前述权利要求中任一项的方法,其中步骤d)包括使步骤c)中鉴定或分离的细菌或其提取物暴露于一种或数种指示细胞,并且选择影响至少一种所述指示细胞的存活能力、生长、代谢、运动性、RNA表达、蛋白质表达、蛋白质分泌或病毒产生的细菌。
12.前述权利要求中任一项的方法,其中该方法包括分离或纯化所述代谢产物的进一步的步骤。
13.前述权利要求任一项的方法,其中所述代谢产物是药用化合物,优选自抗生素、抑菌化合物、抗代谢药、化学治疗化合物、抗寄生虫剂、抗真菌剂、抗病毒化合物、细胞因子活性化合物或细胞生长因子。
14.一种鉴定或分离产生抗生素或抑菌化合物的细菌的方法,该方法包括:
a)提供包含未表征细菌的样品;
b)对所述样品进行反复的辐射处理,优选反复的紫外线处理;
c)从所述经处理样品中鉴定或分离活的或正在生长的细菌;以及
d)使步骤c)中鉴定或分离的细菌或其提取物暴露于参照菌株,并且鉴定或分离显示抗生素或抑菌活性的细菌。
15.权利要求14的方法,还包括分离或纯化由所述细菌产生的抗生素或抑菌化合物的步骤。
16.前述权利要求中任一项的方法,其还包括选择在选择的培养条件,如培养基、营养素、温度、pH值、盐度、氧合、共培养、生物反应器或碳源下存活或生长的细菌的步骤。
17.前述权利要求中任一项的方法,其还包括以生物学、遗传学和/或化学方法对鉴定或分离的细菌或它们的DNA进行修饰以提高所述细菌的存活能力、生长或功能的步骤。
18.一种可通过权利要求1至17中任一项的方法获得的细菌,或其提取物。
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