[发明专利]类黄酮3-O-葡萄糖醛酸基转移酶及编码该酶的多核苷酸

说明书

技术领域

本发明涉及类黄酮3-O-葡萄糖醛酸基转移酶、编码该酶的多核苷酸、含有该多核苷酸的载体及使用该载体而得到的转化体等。

背景技术

以类黄酮、木脂素为代表的多酚植物次生代谢产物多作为健康食品而应用，其在体内通过被称为UGT的糖转移酶(糖苷化酶)进行葡萄糖苷酸结合。通常，因葡萄糖苷酸作为尿液排出，所以，至今为止未将其功能性作为研究对象，但近年来，已开始了解了吗啡葡萄糖苷酸或类黄酮葡萄糖苷酸的生物活性(参照非专利文献1、2)。

作为葡萄酒原料的葡萄科葡萄(Vitis vinifera)是世界性的主要农作物，已知红葡萄酒具有降低心脏病风险、抗肥胖效果等有用的功能性，近年来，由于在红葡萄酒中鉴定出了作为具有抗肥胖效果、延长寿命效果的主要功能性成分的白藜芦醇或二苯乙烯类物质、以及成为法国悖论(French paradox)的主要原因的主要成分的原花青素，因而使红葡萄酒作为功能性食品受到关注(参照非专利文献3～9)。

作为类黄酮的一种即黄酮醇糖苷，已报道了葡萄叶中积累有槲皮素-3-葡萄糖苷及槲皮素-3-葡萄糖醛酸糖苷(参照非专利文献10)。且近年来，还报道了在葡萄果实及葡萄酒中也有各种黄酮醇糖苷的积累(非专利文献11)。特别是槲皮素的3-葡萄糖醛酸糖苷被称为槲皮素-3-葡萄糖苷(miquelianin)，已知作为用作抗抑郁剂的圣约翰草(St.John′s wort，即贯叶连翘提取物)的主要药理成分之一，并表现出通过口服给药从肠道吸收并传递到中枢神经系统，但槲皮素3-鼠李糖苷没有该活性(参照非专利文献12)。进而，还已知槲皮素的3-葡萄糖醛酸糖苷具有抑制LDL分解的效果(参照非专利文献13、14)、减轻H₂O₂所引起的细胞内氧化应激的效果(参照非专利文献15)、抑制血管紧张素所引起的血管肥厚的效果(预防心脏病)(参照非专利文献16)等。

由以上可知，认为将葡萄糖醛酸转移到类黄酮，特别是黄酮醇的3位上的酶对制造功能性类黄酮有用，但至今为止，作为类黄酮的3位糖苷化酶也仅知将葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖及鼠李糖作为糖供体转移，而将葡萄糖醛酸作为糖供体转移的酶及编码该酶的基因还不为人所知(参照非专利文献17～20)。

但近年来，意大利及法国的共同对葡萄(黑皮诺(Pinot Noir)品种)的基因组序列进行了测序，鉴定出了多达240个糖苷化酶(UGT)基因(参照非专利文献21、22)。

但是，即使由基因序列信息推测糖转移酶基因，也不容易基于这些信息通过比对从中鉴定出作为底物的糖的种类和作为受体的物质，且如上所述的候选基因的数量有240个，非常之多，所以，要从这些UGT基因中鉴定出至今为止在其他生物中还未报道过的类黄酮3-O-葡萄糖醛酸转移酶(Flavonoid 3-O-glucuronic acid transferase；F3GAT)是极为困难的。

现有技术文献

非专利文献

非专利文献1：Kroemer，H.K.and Klotz，U.Clin.Pharmacokinet.，vol.23，p.292-310，1992

非专利文献2：Zhang，L.et al.，Eur.J.Pharm.Sci.，vol.31，p.221-231，2007

非专利文献3：Renaud，S.and De Lorgeril，M.，Lancet，vol.339，p.1523-1526，1992

非专利文献4：Gehm，B.D.et al.，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，vol.94，p.14138-14143，1997

非专利文献5：Corder，R.et al.，Nature，vol.414，p.863-864，2001

非专利文献6：Lamming，D.W.et al.Mol.Microbiol.，vol.53，p.1003-1009，2004

非专利文献7：Corder，R.et al.，Nature，vol.444，p.566，2006

非专利文献8：Baur，J.A.and Sinclair，D.A.，Nature Rev.Drug Discovery，vol.5，p.493-506，2006

非专利文献9：Baur，J.A.et al.，Nature，vol.444，p.337-342，2006