[发明专利]利用转氨酶使多环化合物氨基化的方法

权利要求书

1.方法，利用至少一种具有转氨酶活性的酶E，用于使在带有至少一个酮基团的多环的环体系中的至少一个酮基团氨基化而得到氨基基团。

2.权利要求1的方法，特征在于作为多环的环体系使用具有顺式-连接的环的那些。

3.权利要求1或2中至少一项的方法，特征在于作为多环的环体系使用选自下组的化合物

。

4.权利要求1到3中至少一项的方法，特征在于使用来自谷氨酰胺-鲨肌醇转氨酶（EC编号：2.6.1.50）类别的酶。

5.权利要求1到4中至少一项的方法，特征在于酶E能够从芽胞杆菌属、小单孢菌属或链霉菌属的微生物分离。

6.权利要求1到5中至少一项的方法，特征在于酶E能够从环状芽孢杆菌或灰色链霉菌的微生物分离。

7.权利要求1到6中至少一项的方法，特征在于具有转氨酶活性的酶包含根据SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31或SEQ ID NO：33的多肽序列，或选自包含SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31或SEQ ID NO：33的酶的功能等效物的组，其中通过删除、插入、取代、插入或删除、取代和插入的组合使得相对于相应的SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31和SEQ ID NO：33至多25%的氨基酸残基被修饰，且其仍保持了根据SEQ ID NO：2、SEQ ID NO：4、SEQ ID NO：7、SEQ ID NO：9、SEQ ID NO：11、SEQ ID NO：13、SEQ ID NO：15、SEQ ID NO：17、SEQ ID NO：19、SEQ ID NO：21、SEQ ID NO：23、SEQ ID NO：25、SEQ ID NO：27、SEQ ID NO：29、SEQ ID NO：31和SEQ ID NO：33的相应酶至少50%的酶活性。

8.权利要求1到7中至少一项的方法，特征在于使用带有至少一个酮基团的多环的环体系，所述环体系通过氧化多环的起始环体系的至少一个仲羟基基团而得到酮。

9.权利要求8中的方法，特征在于使用具有至少一个仲羟基基团的多环的起始环体系，在所述多环的起始环体系中，所述仲羟基基团的至少之一处于相对于所述多环起始环体系的内-位置。

10.权利要求8或9的方法，特征在于使用具有至少一个仲羟基基团的多环的起始环体系，在所述多环的起始环体系中，所述仲羟基基团的至少之一处于相对于所述多环起始环体系的外-位置。

11.权利要求8到10中至少一项的方法，特征在于作为多环的起始环体系使用选自下组的至少一种化合物：

去水甘露糖醇，

异山梨醇，

异艾杜糖，

。

12.权利要求8到11中至少一项的方法，特征在于所述氧化由具有乙醇脱氢酶活性的酶F来催化。

13.权利要求12的方法，特征在于由酶E和F的酶反应产生的副产物通过使用具有氨基酸脱氢酶活性的至少一种酶G来再生。