[发明专利]野油菜黄单胞菌野油菜致病变种抗性芸苔属植物及其制备

说明书

说明

本发明涉及野油菜黄单胞菌野油菜致病变种(Xanthomonas campestris py.campestris)(Xcc)抗性芸苔属植物及其种子、果实和/或植物部分，及其制备方法。具体说，本发明涉及Xcc抗性甘蓝植物。本发明还涉及这些抗性植物的种子、果实和/或其它植物部分。另外，本发明还涉及提供本发明的Xcc抗性的数量性状基因座(QTL)和分子标记，特别是用于鉴定本发明的QTL的随机扩增的微卫星多态性(RAMP)标记。

微生物野油菜黄单胞菌野油菜致病变种是十字花科植物黑腐病的主要病因。在世界范围内，该微生物可能是十字花科疾病的主要病原体。黑腐病常见于欧洲、美洲、亚洲、澳大利亚和大洋洲的部分。该细菌病的主要宿主植物是甘蓝。然而，黑腐病也见于其它十字花科植物，杂草或装饰植物中。野油菜黄单胞菌野油菜致病变种的感染通常在叶子的排水器中发生，在一些情况下也见于气孔或伤口中。原发性感染后，该微生物通过维管束散播，从而导致维管变黑，和叶子中的V形损伤。结果，叶子的一部分或多个部分枯萎变黄。

野油菜黄单胞菌野油菜致病变种是一种可通过种子传播的疾病，能够在发病早期通过种子感染植物。

该微生物能够在种子上存活长达三年之久。该微生物的感染还能通过植物部分储藏、次级宿主植物和灌溉系统发生。

通过化学药物控制这种疾病是不可能的。抵抗该疾病的唯一可行的方法是使用无病害，即无微生物的起始材料和卫生措施，例如除去受感染宿主植物。可通过使用无病原体的种子或物理处理受感染的种子来获得无病害起始材料。为了栽培健康植物，即无Xcc植物，特别优选使用和获得抗性植物品种，其在生长季节期间仍然不受Xcc感染。

芸苔属是芸苔科(先前所称十字花科)的植物属。该属的成员也被称为包心菜或芥菜。芸苔属包括许多重要的农业和园艺作物，包括油菜、花椰菜、红球甘蓝、皱叶甘蓝、白球甘蓝、牛心甘蓝、羽衣甘蓝、椰菜、芽甘蓝、大白菜、球茎甘蓝和葡萄牙甘蓝(tronchuda)。

芸苔属植物的各种植物部分可食用，例如根(球茎甘蓝)、茎(球茎甘蓝)、叶(例如白球和红球甘蓝)、腋芽(芽甘蓝)、花(花椰菜、椰菜)。另外，油菜和油菜籽也被用于提供植物油。种植一些开白花或紫花，或具有不同颜色或叶子性状的品种用于装饰。

考虑到芸苔属植物对于食物生产的重要性，以及与野油菜黄单胞菌野油菜致病变种感染有关的经济损失，本发明的目的之一是提供Xcc抗性芸苔属植物及其制备方法。

缺乏控制黑腐病的充分、经济和有效的手段进一步表明需要Xcc抗性芸苔属植物。例如，对该细菌没有有效杀菌剂。

通过如权利要求1所述的提供Xcc抗性芸苔属植物的方法实现本发明的上述目的和其它目的。

特别是，本发明的上述目的等是通过提供野油菜黄单胞菌野油菜致病变种抗性芸苔属受体植物的以下方法实现的，该方法包括：-选择第一甘蓝供体植物，其在基因组内含有数量性状基因座1(QTL1)；选择第二甘蓝供体植物，其在基因组内含有数量性状基因座2(QTL2)；和将来自第一供体植物的数量性状基因座1(QTL1)和来自第二供体植物的数量性状基因座2(QTL2)基因渗入或基因组合并入甘蓝受体植物；其中，

数量性状基因座1(QTL1)的特征是一个或多个RAMP标记，选自158-162bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：1和引物6；283-287bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：2和引物6；370-374bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：3和引物6；以及41-45bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：4和引物6。

数量性状基因座2(QTL2)的特征是一个或多个RAMP标记，选自88-92bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：5和引物6；125-129bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：6和引物6；334-338bp的片段，具有引物组合SEQ ID No：7和引物6；和47-51bp的片段，具有引物组合SEQ ID NO：8和引物6；和

其中，就基因组而言，所述芸苔属受体植物与第一和第二甘蓝供体植物不同。

根据本发明的该第一个方面，通过确定与各供体植物基因组中本发明Xcc抗性的存在相关的数量性状基因座(QTL)的存在来选择或鉴定第一和第二供体植物。

优选通过使用本领域公知的标准分子生物学技术作出这种确定。这些技术的一个例子包括分离可能供体植物的基因组DNA，然后通过例如PCR、DNA指纹法或Southern印迹法确定分离的基因组中相关数量性状基因座(QTL)的存在。