[发明专利]用于检测GI癌转移的方法

权利要求书

1.一种用于检测在从受试者体内收集的样品中的GCC的方法，包括以下步骤：

·检测所述样品中的鸟苷酸环化酶C(GCC)；

·检测同一个所述样品中的β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)；并且

·计算相对于GUSB的量的GCC的量。

2.根据权利要求1所述的方法，该方法包括以下步骤：

·测量所述样品中GCC mRNA的表达水平；

·测量同一个所述样品中的GUSB mRNA的表达水平；并且

·使用一种数学计算将GCC mRNA的表达水平归一化到GUSB的表达水平进行标准化以确立一个相对GCC表达(GUSB水平减去GCC水平)或(GCC水平减去GUSB水平)。

3.根据权利要求2所述的方法，包括以下步骤：

·通过RT-qPCR测量样品中GCC的表达水平以确定一个GCC的循环阈值(Ct_GCC)；

·通过RT-qPCR测量同一样品中的β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)以确定GUSB的循环阈值(Ct_GUSB)；并且

其中GCC的检测使用相对定量(Δ-Ct)以确定样品中GCC的mRNA水平的变化，并且相对于β-葡萄糖醛酸酶(GUSB)的mRNA水平将它表示为(Δ-Ct＝Ct_GUSB减去Ct_GCC)。

4.根据权利要求3所述的方法，其中高于大约-12的Δ-Ct表明样品中GCC阳性细胞的存在。

5.根据权利要求3所述的方法，其中使用表达水平变化(Δ-Δ-Ct)来确定所述样品中的GCC的mRNA水平的变化，并且相对于同一样品中的β-葡萄糖醛酸酶(GUSB)的mRNA水平将它进行了表示。

6.如权利要求1至5中任何一项所述的方法，其中所述样品是一种肠外/结肠直肠外样品并且所述受试者是人类。

7.如权利要求6所述的方法，其中所述人类被怀疑患有选自下组的癌，该组由以下各项组成：结肠直肠癌、胃癌、小肠癌、食道癌以及胰腺癌。

8.如权利要求7所述的方法，其中所述肠外/结肠直肠外样品是选自下组，该组由以下各项组成：活检组织、一个或多个淋巴结、以及血液。

9.一种诊断在被怀疑患有癌症的病人体内的癌症的方法，包括以下步骤：根据权利要求1至5中任何一项对所述病人的肠外/结肠直肠外样品中的GCC进行定量；并且确定所述样品是否隐藏GCC阳性细胞；由此GCC阳性细胞的存在指示了结肠直肠癌、胃癌、小肠癌、食道癌或胰腺癌。

10.一种将已经被诊断患有癌症的人类病人进行分期的方法，包括以下步骤：

a)根据权利要求1至5中任何一项所述检测或测量GCC；以及

b)基于步骤a的结果确立一种疾病分期。

11.根据权利要求10所述的方法，包括以下步骤：

·通过RT-qPCR测量所述样品中的GCC以确定来自所述病人的肠外/结肠直肠外样品中的GCC的循环阈值(Ct_GCC)；

·通过RT-qPCR测量所述样品中的β-葡萄糖苷酸酶(GUSB)以确定所述样品中GUSB的循环阈值(Ct_GUSB)；并且

·确立Ct_GUSB-Ct_GCC的相对定量(Δ-Ct)，

其中高于大约-12的Δ-Ct表明样品中GCC阳性细胞的存在，其中GCC阳性细胞的存在表明转移的结肠直肠癌、胃癌、小肠癌、胰腺癌或食道癌。

12.如权利要求11所述的方法，其中高于约-6的Δ-Ct表明样品中GCC阳性细胞的存在，由此GCC阳性细胞的存在表明该病人具有增加的癌症复发风险。

13.如权利要求11所述的方法，其中该肠外/结肠直肠外样品是至少一个淋巴结。