[发明专利]肝内胆管癌的检出、辨别方法

说明书

技术领域

本发明涉及提供在早期用简便的方法、灵敏度良好且切实地检出、辨别作为肝脏原发的恶性肿瘤的肝内胆管癌的方法以及用于此的试剂盒，进一步地，具体地说，涉及提供以由来源于肝内胆管癌的凝集素WFA(多花紫藤凝集素(Wisteria fioribunda Agglutinin))结合性糖蛋白质构成的糖链生物标记物作为癌标记物，检出该糖链生物标记物的肝内胆管癌特异性糖链结构，由此早期且特异性地检出肝内胆管癌，以此为手段，在适用性、灵敏度、精度的方面，以临床上容许的性能且利用临床上可以适用的简便的手段，检出以及辨别肝内胆管癌的方法以及用于此的试剂盒。

背景技术

癌位列日本致死疾病的第一位，大幅领先于心疾病、脑疾病等其它疾病所导致的死亡人数。另一方面，癌在大部分、所有内脏器官中通过发病、恶化而向各种内脏器官浸润转移。因此，为了对于癌进行有效的治疗，通过早期发现，在可以治疗的时期进行处理比什么都重要。现在，由于通过各种诊断方法的开发以及诊断可以早期发现，从而伴随早期治疗，延长寿命。然而，尽管开发了各种诊断和治疗方法，但是仍然会由于来自原发病灶的浸润转移而对治疗带来困难，经历甚至死亡的疗程。

肝癌为存在于肝脏的恶性肿瘤。肝癌可以分为肝脏原发的原发性肝癌和在肝以外的内脏器官产生的癌种转移到肝内而产生的转移性肝癌。肝脏产生的主要的恶性肿瘤(原发性肝癌)存在来源于肝细胞的肝细胞癌和来源于胆管上皮细胞的肝内胆管癌(或胆管细胞癌)。也存在应该视为两者的混合型的原发性肝癌。肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma：HCC)为来源于肝细胞的恶性肿瘤，占原发性肝癌的90％以上。肝细胞癌大部分由病毒性肝炎产生。肝内胆管癌(Intrahepatic cholangiocarinoma：ICC)为占原发性肝癌的3％的癌，难以在早期发现，外科上切除后的存活率低，对于化学疗法缺乏反应性，预后不良。

为了早期检出肝癌，一直以来开发了使用肿瘤标记物的检出手段。对于肝细胞癌，直到现在开发了大量的癌检出用的标记物。例如α1胎蛋白(AFP)在临床上用作肝细胞癌的肿瘤标记物，此外，PIVKA-II(New Eng.J.Med.310，1427-1431，1984)也用作肝细胞癌的肿瘤标记物。此外，作为肝癌的肿瘤标记物，例如已知CEA、CA19-9、KMO-1、DuPAN-2、SPan-1、CA50、SLX、碱性胎蛋白(BFP)、NCC-ST-439、碱性磷酸酶同功酶、γ-GTP同功酶、IAP、TPA、β2-微球蛋白、铁蛋白、POA和胰蛋白酶抑制剂等(日本特开2002-323499号公报)。

此外，近年，作为由在肝细胞癌中表达的基因、多肽构成的肝细胞癌的肿瘤标记物，公开了很多。例如公开了Gla不全第VII凝血因子(日本特开平8-184594号公报)，醛缩酶β基因、氨基甲酰磷酸酯合成酶I基因、纤溶酶原基因、EST51549、白蛋白基因、细胞色素P450亚科2E1基因、视黄醇结合蛋白质基因、或有机阴离子转运蛋白C基因(日本特开2004-105013号公报)，具有锌指区以及SET区的人基因ZNFN3A1(日本特表2005-511023号公报)，作为硫酸乙酰肝素蛋白聚糖的磷脂酰肌醇聚糖-3(GPC3)(日本特表2005-526979号公报)，位于染色体带1p36.13的区域、调节肌动蛋白细胞骨架的解聚的发生·促分化因子1(DDEFL1)(日本特表2005-503176号公报)等由基因或多肽构成的肝细胞癌的肿瘤标记物。

进一步地，公开了由下述基因或多肽构成的肝细胞癌的肿瘤标记物：染色体区域的8p12、16p13.2-p13.3、16q23.1-q24.3或19p13.2-p13.3区域中的缺损的有无(日本特开2006-94726号公报)，编码富半胱氨酸分泌蛋白的家族的Wnt-1(日本特开2007-139742号公报)，氨基甲酰基-磷酸酯合成酶L链MGC47816和含有螺旋-环-螺旋区和橙色域(orange domain)的蛋白质HES6的基因(日本特表2007-506425号公报)，由SEMA5A(臂板蛋白5A)、SLC2A2(溶质载体家族成员)、ABCC2(ATP结合盒亚家族-C成员2)、或HAL(组氨酸脱氨酶)构成的细胞关联性的肝细胞癌(HCC)蛋白质(日本特表2007-534722号公报)，或人α2、6唾液酸转移酶(日本特开2007-322373号公报)等。