[发明专利]在植物中控制关键乙烯激素信号传导途径蛋白的目标周转率以调节乙烯敏感性

权利要求书

1.一种可控地抑制乙烯诱导性蛋白在植物细胞中蓄积的基因表达系统， 其包括：

激活盒，激活盒包括在与其操作性相连的合适启动子控制下的以下组件： (a)识别选定效应元件的DNA-结合域(DBD)；(b)蜕皮激素受体配体结合域 (EcRLBD)；和(c)在诱导组合物存在下活化的激活域(AD)；和

靶标盒，其包括(d)诱导型启动子，该启动子包含操作性相连的效应元件 和最小启动子，(a)的DBD结合所述效应元件，最小启动子对(c)的AD起反应， 所述诱导型启动子控制(e)编码表达时能降低EIN2或EIN3基因产物表达的 所选调控蛋白的核酸序列的表达；

在植物细胞中，所述激活盒和靶标盒操作性相连，以便通过与诱导组合物 相互作用可控地提高所选调控蛋白的表达，以抑制乙烯存在下EIN2或EIN3 基因产物在植物中的蓄积，对所述EIN2或EIN3蛋白表达蓄积的抑制作用可 受施加诱导组合物的时机、浓度和持续时间的控制。

2.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述激活盒和靶标盒位于同 一质粒上。

3.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述激活盒和靶标盒分别位 于单独的质粒上。

4.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述激活盒的启动子选自： 组成型启动子、植物细胞特异性启动子、植物组织特异性启动子、植物器官特 异性启动子、诱导型启动子、发育特异性启动子和细胞分化特异性启动子。

5.如权利要求4所述的系统，其特征在于，所述启动子是组成型启动子。

6.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述DBD选自：GAL4 DBD、 LexA DBD、转录因子DBD、H类核受体成员DBD、甾体/甲状腺激素核受体 超家族成员DBD、细菌LacZ DBD、EcR DBD、cI启动子DBD。

7.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述蜕皮激素受体EcRLBD 包括无脊椎动物蜕皮激素受体或其突变体的全部或其一部分。

8.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述激活域选自：VP16、糖 皮质激素激活域和Gal4激活域。

9.如权利要求1所述的系统，其特征在于，所述诱导型启动子包含操作 性相连的最小启动子序列以及一个或多个拷贝的对应于激活盒中DNA结合域 的效应元件。

10.如权利要求1所述的系统，其特征在于，编码所选蛋白质的所述核酸 序列选自EIN2调控基因ETP1和ETP2，结合EIN3的F盒蛋白，EBF1和EBF2， 以及它们的突变体。

11.如权利要求1所述的系统，其包括：

激活盒，包括与其操作性相连的组成型G10-90启动子控制下的以下组件： (a)识别包含5个拷贝的GAL4效应元件的效应元件的GAL4 DBD；(b)蜕皮激 素受体LBD；和(c)在诱导组合物存在时活化的VP16 AD；和

靶标盒，其包括(d)诱导型启动子，该启动子包含操作性相连的5个拷贝 的GAL 4效应元件和对VP16 AD的活化起反应的最小35S启动子，所述诱导 型启动子控制(e)编码ETP1或ETP2蛋白的核酸序列的表达；

在植物细胞中，所述激活盒和靶标盒操作性相连，以便通过与诱导组合物 相互作用可控地提高ETP1或ETP2的表达，以抑制乙烯存在下EIN2基因产物 在植物中的蓄积，对所述EIN2蛋白表达蓄积的抑制作用可受施加诱导组合物 的时机、浓度和持续时间的控制。

12.一种组合物，其包含稳定表达权利要求1或11所述的基因表达系统 的转基因植物细胞、转基因植物组织或器官、或者转基因植物。