[发明专利]作为癌症标记的CHK2多态型

说明书

本发明涉及确定治疗癌症的合适疗法的诊断方法。

癌症治疗的必要方面是首先实现明确诊断。诊断提供关于疾病实际阶段的信息，这对于随后要使用的治疗类型也是决定性因素，所述治疗类型为例如手术去除肿瘤和可任选的辐射和药物治疗，也可能使用物理方法(例如高热疗法)。经典的诊断方法包括所谓的“分期(staging)”和“分级(grading)”。分期描述了肿瘤大小和其侵袭，并检测淋巴结是否受到影响和是否存在远处转移灶(例如TNM分期系统)。分级是组织学检测肿瘤细胞，其中较低的恶性潜能归于高分化的肿瘤细胞而不是分化较差或去分化细胞。该分类在预测单独个体方面受到限制，临床经验显示具有相同肿瘤阶段的病人表现出明显不同的疾病进程和对治疗的不同反应，这在极端变化的存活阶段最清楚。

由于此原因，临床实践需要提供额外和更确切的、能改善癌症个体预断的标记。在乳癌病例中，其可通过将组织化学标记用于雌激素受体表达分析来实现。

另一种方法是搜索基因缺陷，例如肿瘤抑制基因中的体细胞突变。新方法尝试通过基因表达谱方法来预测疾病进程。癌症治疗的另一个问题是预测癌症药物的有效性、各最优剂量或治疗持续时间，以及预测严重和危险副作用的出现。例如，一些用伊立替康进行治疗的病人受到严重副作用折磨的情况可归咎于UGT1A1基因的遗传多态性。预先基因分析能在治疗开始前鉴定这类病人，并调整剂量。

此外，使用以生物技术方法生产的药物的疗法费用较贵，未来这些疗法将会限于病人，治疗效能可能取决于他们各自的状况。

恶性肿瘤的基本性质

癌细胞的特征是失去接触抑制和细胞生长不受控。这种改变自发或通过有害物(noxae)(破坏基因组的所谓致癌物质)引起。该有害物质包括许多化学物质、吸烟以及UV光。此外，遗传因素在癌症发展中起到重要作用。除了不受限制的生长，在其它器官中形成“后代肿瘤”(转移灶)的趋势是癌细胞的特征。转移灶通常经血液或淋巴管传播。在大部分病例中，癌症不可治愈且是致命的。治疗方法旨在通过手术去除原发肿瘤和转移灶。另外，可以用辐射治疗肿瘤。可尝试用所谓的细胞生长抑制剂、针对特定蛋白或表面标记的抗体或免疫调节物质(细胞因子、干扰素)杀死迅速增殖的细胞或诱导调亡。

确定癌症进程的预断因素具有很强相关性，其提供对特定治疗形式的反应的信息或能用于总体预测转移灶发生、肿瘤进展和存活。

显然，有多种单独、未发现的生物变量，其确定具有独立分期和分级的肿瘤疾病进程。这些因素包括遗传的宿主因素。还需要发展能预测肿瘤发生的遗传标记。此类标记用于将进一步的筛选方法(血清学、放射显影、超声波检查、MRT等)关注的人适时纳入。这允许在早期阶段诊断和治疗癌症，早期肿瘤的恢复和存活机会显著高于晚期肿瘤。

DNA修复机制的意义

由于DNA修复机制，细胞能去除DNA结构的缺陷性改变。这种DNA中的损伤可在DNA复制中自发产生，或由于致突变物质、极端高温或电离辐射的影响而产生。DNA损伤可导致有丝分裂的DNA复制以错误方式进行、蛋白质不再合成或错误合成或导致必要的染色体区域在双键打开后被切割。如果细胞的复杂修复机制不成功，增殖和休眠的体细胞中积累的缺陷数量大幅增加，使得正常细胞功能缺损。在生殖细胞中，子代细胞不再能存活，导致细胞系失活：细胞或第二或第三连续世代分别失去细胞分裂能力并死亡。在细胞周期控制中，控制蛋白能识别缺陷细胞或其DNA，并引起细胞周期停止或程序性细胞死亡(调亡)。

细胞周期检测点激酶2的意义

细胞最重要的功能是维持基因组完整性。出于此原因，有许多控制机制来确保细胞周期内所有过程被正确终止。这些控制机制称为“检测点^[1]”。如该术语所示，这些是未精确定义的点，而是通过可在特定条件下起始的级联反应。

迄今已鉴定了一些细胞周期检测点。哺乳动物中研究最充分的检测点示于图1。一方面，存在由不同细胞周期阶段中的DNA损伤激活的DNA损伤检测点。外源因素如辐射，以及内源性事件如自发突变均会引起该损伤。另一方面，复制检测点通过不完整或缺陷性DNA复制激活。纺锤体检测点控制两极纺锤体的形成、着丝粒的附着和着丝点结构的形成。

只要这些过程未完全终止或损伤未修复，细胞向细胞周期下个阶段的转变就会受到抑制以确保维持细胞的基因组完整性。