[发明专利]抗革兰氏阳性细菌疫苗中的Cna_B结构域

说明书

本申请要求2009年1月12日提交的US 61/143,859的优先权，其全部内容通过引用纳入本文。

发明领域

本发明涉及免疫学和疫苗学领域。具体地说，本发明涉及衍生自革兰氏阳性细菌的抗原及其在免疫中的应用。

发明背景

革兰氏阳性细菌包括最具毒力的人和动物病原体中的一些，它们导致许多严重的疾病和随之的后遗症。暴露于不断需要有效的疫苗来抵御革兰氏阳性细菌感染。

附图简述

图1A.与侧接结构域(″Fb信号″)克隆在一起的酿脓链球菌(S.pyogenes)蛋白Cpa_M18(Spy_M18_0126)的Cna_B结构域(″Cna_B-Fb″)的氨基酸序列(SEQ ID NO：1)。图1B.所克隆结构域的图示。参见实施例1。

图2.含有纯化的重组His-标记的Cna_B-Fb结构域的SDS-聚丙烯酰胺凝胶。参见实施例1。

图3A-D.证明酿脓链球菌Cpa_M18(Spy_M18_0126)Cna_B-Fb结构域是免疫原性的和Cna_B-Fb结构域抗血清识别酿脓链球菌各种M菌株的Cpa和F2(MGAS2O96_Spy0119)蛋白质(图3A-C)以及无乳链球菌(S.agalactiae)(图3C-D)和肺炎链球菌(S.pneumoniae)(图3D)的菌毛组分的蛋白质印迹。参见实施例1。

图4A-B.比较Cna_B-Fb抗血清(图4A)与Cpa_M18抗血清(图4B)的反应性的蛋白质印迹。参见实施例1。

图5.图示了利用重组Cna_B-Fb产生的抗血清(参见实施例1)和分化HL-60细胞进行无乳链球菌菌株515和JM的调理吞噬试验结果。参见实施例2。

图6.图示了无乳链球菌突变型菌株R13(缺乏菌毛岛2)及其含有酿脓链球菌菌毛M1或酿脓链球菌菌毛M6的互补菌株的调理吞噬试验结果。参见实施例2。

图7.各种酿脓链球菌菌株的Cpa蛋白的Cna_B结构域的氨基酸序列比对。Cna_B_Cpa_M5_Manfredo(Spy_M5_0104；SEQ ID NO：18)，SEQ ID NO：2；Cna_B_Cpa_M28(M28_Spy0107，SEQ ID NO：19)，SEQ ID NO：3；Cna_B_Cpa_M12(MGAS2096_Spy0113，SEQ ID NO：20)，SEQ ID NO：4；Cna_B_Cpa_M1(M5005_Spy_0107，SEQ ID NO：21)，SEQ ID NO：5；Cna_B_Cpa_M3(SpyM3_0098，SEQ ID NO：22)，SEQ ID NO：6；Cna_B_Cpa_M18(spyM18_0126，SEQ ID NO：23)，SEQ ID NO：7；Cna_B_Cpa_M6(M6_SpyO159，SEQ ID NO：24)，SEQ ID NO：8；Cna_B_Cpa_M4_C(MGAS10750_Spy0115，SEQ ID NO：25)，SEQ ID NO：9；Cna_B_Cpa_M2(MGAS 10270_Spy0113，SEQ ID NO：26)，SEQ ID NO：10。

图8.各种无乳链球菌的菌毛蛋白的Cna_B结构域的氨基酸序列比对。Cna_B_GBS_52(SAG 0646，SEQ ID NO：45)，SEQ ID NO：27；Cna_B_GBS_150(SAL 1482，SEQ ID NO：26)，SEQ ID NO：28；Cna_B_GBS_104_1(SAG 0649，SEQ ID NO：47)，SEQ ID NO：29；Cna_B_GBS_67(SAL 1487，SEQ ID NO：48)，SEQ ID NO：30；Cna_B_GBS_1523(SAN 1518，SEQ ID NO：49)，SEQ ID NO：31；Cna_B_GBS_1524(SAN 1519，SEQ ID NO：50)，SEQ ID NO：32；Cna_B_GBS_80(SAG 0645，SEQ ID NO：51)，SEQ ID NO：33；Cna_B_GBS_104_2(SAG 0649，SEQ ID NO：47)，SEQ ID NO：34；和Cna_B_GBS_1521(SAN 1516，SEQ ID NO：52)，SEQ ID NO：35。