[发明专利]效应子功能降低的稳定Fc多肽及使用方法

权利要求书

1.一种包含嵌合Fc区的稳定多肽，其中所述稳定多肽包含至少一个来自IgG4同种型的IgG抗体的CH2域和至少一个来自IgG1同种型的IgG抗体的CH3域，其中所述稳定多肽包含位于一个或多个选自297、299、307、309、399、409和427(欧盟编号规定)的氨基酸位置的一个或多个稳定Fc氨基酸。

2.根据权利要求1所述的稳定多肽，其中所述嵌合Fc区包含铰链、来自IgG4同种型的IgG抗体的CH1域和CH2域和来自IgG1同种型的IgG抗体的CH3域，并且其中所述抗体包含位于氨基酸位置228(欧盟编号)的脯氨酸。

3.一种包含来自IgG4抗体的Fc区的CH2部分的稳定多肽，其中所述稳定多肽包含位于一个或多个选自240F、262L、264T、266F、297Q、299A、299K、307P、309K、309M、309P、323F、399S和427F(欧盟编号规定)的氨基酸位置的一个或多个稳定氨基酸。

4.根据权利要求3所述的稳定多肽，其包含位于氨基酸位置297的谷氨酰胺。

5.一种包含来自IgG1抗体的Fc区的CH2部分的稳定多肽，其中所述稳定多肽包含位于一个或多个选自299K和297D(欧盟编号规定)的氨基酸位置的一个或多个稳定氨基酸。

6.根据权利要求4所述的稳定多肽，其包含位于氨基酸位置299的赖氨酸。

7.根据权利要求5所述的稳定多肽，其包含位于氨基酸位置299的赖氨酸和位于氨基酸位置297的天冬氨酸。

8.根据权利要求4所述的稳定多肽，其中所述Fc区为无糖基化Fc区。

9.根据前述权利要求中任一项所述的稳定多肽，其中IgG抗体为人源抗体。

10.根据前述权利要求中任一项所述的稳定多肽，其中相对于缺乏稳定氨基酸的亲本多肽，所述稳定多肽的解链温度(Tm)至少升高1℃。

11.根据权利要求10所述的稳定多肽，其中所述稳定Fc多肽的解链温度(Tm)升高约1℃或更多、约2℃或更多、约3℃或更多、约4℃或更多、约5℃或更多、约6℃或更多、约7℃或更多、约8℃或更多、约9℃或更多、约10℃或更多、约15℃或更多和约20℃或更多。

12.根据权利要求10所述的稳定多肽，其中在中性pH(约6.5至约7.5)下所述解链温度(Tm)升高。

13.根据权利要求10所述的稳定多肽，其中在约6.5或更低、约6.0或更低、约5.5或更低、约5.0或更低、约4.5或更低和约4.0或更低的酸性pH下，所述解链温度(Tm)升高。

14.根据前述权利要求中任一项所述的稳定多肽，其中相对于缺乏稳定突变的亲本多肽，所述稳定多肽以更高的产量表达。

15.根据权利要求14所述的稳定多肽，其中在细胞培养物中稳定Fc多肽以产量为约5mg/L或更高、约10mg/L或更高、约15mg/L或更高、约20mg/L或更高表达。

16.根据前述权利要求中任一项所述的稳定多肽，其中相对于缺乏所述稳定氨基酸的亲本多肽，所述稳定多肽的浊度降低。

17.根据权利要求16所述的稳定多肽，其中所述浊度以选自以下各项的倍数降低：约1倍或更高、约2倍或更高、约3倍或更高、约4倍或更高、约5倍或更高、约6倍或更高、约7倍或更高、约8倍或更高、约9倍或更高、约10倍或更高、约15倍或更高、约50倍或更高和约100倍或更高。

18.根据前述权利要求中任一项所述的稳定多肽，其中与缺乏所述稳定突变的亲本Fc多肽相比，所述稳定多肽的效应子功能降低。

19.根据权利要求18所述的稳定多肽，其中所述降低的效应子功能为降低的ADCC活性。

20.根据权利要求18所述的稳定多肽，其中所述降低的效应子功能为降低的与选自FcγRI、FcγRII和FcγRIII的Fc受体(FcR)的结合。