[发明专利]用于生成抗体混合物的方法

权利要求书

1.一种用于在单一重组宿主细胞中生成包含两种或更多种不同抗体的混 合物的方法，包括在所述宿主细胞中表达：

a)至少一种编码共同轻链的核酸构建体，和

b)两种或更多种编码重链的核酸构建体，所述两种或更多种核酸构建 体包含

b1)两种或更多种编码两种或更多种不同的第一重链的核酸构建 体，其中所述第一重链的每个恒定区的氨基酸序列经过修饰， 使得铰链区及如免疫球蛋白亚型所要求的CH区的其它区域， 诸如CH3区，不含有任何在IVIG存在下或在施用于哺乳动物或 人类时能够与相同的CH区形成二硫键或共价或稳定非共价重 链间键的氨基酸残基，

或

b2)至少一种编码第一重链的核酸构建体，其中恒定区的氨基酸序 列经过修饰，使得铰链区及如免疫球蛋白亚型所要求的CH区 的其它区域，诸如CH3区，不含有任何能够在IVIG存在下或在 施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形成二硫键或共价或 稳定非共价重链间键的氨基酸残基，和

至少一种编码第二重链的核酸构建体，其中所述第二重链能够 在IVIG存在下或在施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形 成二硫键或共价或稳定非共价重链间键，

其中每种所述重链能够与所述轻链配对以形成功能性抗体。

2.依照权利要求1的方法，其中所述方法包括在所述宿主细胞中表达：两 种或更多种编码两种或更多种不同第一重链的核酸构建体，其中所述第 一重链的每个恒定区的氨基酸序列经过修饰，使得所述铰链区和如免疫 球蛋白亚型所要求的CH区的其它区域，诸如CH3区，不含有任何能够在 IVIG存在下或在施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形成二硫键或 共价或稳定非共价重链间键的氨基酸残基。

3.依照权利要求1的方法，其中所述方法包括在所述宿主细胞中表达：

-至少一种编码第一重链的核酸构建体，其中恒定区的氨基酸序列经 过修饰，使得铰链区及如免疫球蛋白亚型所要求的CH区的其它区 域，诸如CH3区，不含有任何能够在IVIG存在下或在施用于哺乳动 物或人类时与相同的CH区形成二硫键或共价或稳定非共价重链间 键的氨基酸残基，和

-至少一种编码第二重链的核酸构建体，其中所述第二重链能够在 IVIG存在下或在施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形成二硫 键或共价或稳定非共价重链间键。

4.一种用于在单一重组宿主细胞中生成包含两种或更多种不同抗体的混 合物的方法，包括在所述宿主细胞中表达

a)至少一种编码共同轻链的核酸构建体，和

b)两种或更多种编码重链的核酸构建体，所述两种或更多种核酸构建 体包含

b1)两种或更多种编码两种或更多种不同第一IgG4重链的核酸构 建体，其中所述第一IgG4重链的每个恒定区的氨基酸序列经过 修饰，使得铰链区不含有任何能够在IVIG存在下或在施用于哺 乳动物或人类时与相同的CH区形成二硫键或共价或稳定非共 价重链间键的氨基酸残基，

或

b2)至少一种编码第一IgG4重链的核酸构建体，其中恒定区的氨基 酸序列经过修饰，使得铰链区不含有任何能够在IVIG存在下或 在施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形成二硫键或共价 或稳定非共价重链间键的氨基酸残基，和

至少一种编码第二重链的核酸构建体，其中所述第二重链能够 在IVIG存在下或在施用于哺乳动物或人类时与相同的CH区形 成二硫键或共价或稳定非共价重链间键，前提是所述第二重链 不是野生型IgG4重链，

其中每种所述重链能够与所述轻链配对以形成功能性抗体。