[发明专利]用于灭活病毒的方法

说明书

发明领域

本发明涉及用于灭活病毒和医疗装置或设备消毒或灭菌的方法。

发明背景

大多数真菌、病毒和病原细菌的营养细胞在70摄氏度时可在数分钟内杀死或灭活；然而，有些病原病毒(如脊髓灰质炎病毒)灭活困难得多。此外，因为敏感的医疗装置在接触所述高温时经常会缩短使用寿命，所以需要使用较低温度和温和条件同时保持病毒灭活能力的用于医疗装置消毒的方法。

特别值得注意的是小无包膜病毒，如脊髓灰质炎病毒(poliovirus)、细小病毒(parvovirus)和甲肝病毒(hepatitis A virus)。这些是小(直径23-27纳米)的无包膜人类病原，已经证明其可耐受去除和灭活过程，所述过程针对脂质包膜病毒如HIV、乙肝和丙肝病毒显示效用。

小无包膜病毒的高度稳定亚类是肠病毒(Enteroviruse)(例如脊髓灰质炎病毒和甲肝病毒)，其耐受低于三的pH水平、洗涤剂、70％乙醇和其它脂质溶剂，如氯仿和醚。由于它们也耐受消毒剂如5％Lysol和1％季铵化合物，所以肠病毒特别难于灭活。

本发明提供用于灭活病毒的改进的酶促方法，其对于敏感性材料(如医疗装置)比传统方法更温和。

发明简述

本发明提供用于灭活病毒的方法，包括使所述病毒接触卤过氧化物酶、过氧化氢源、氯离子和/或溴离子，和铵离子。

在一个实施方案中，卤过氧化物酶是氯过氧化物酶或溴过氧化物酶。在另一个实施方案中，卤过氧化物酶是含有钒的卤过氧化物酶。

发明详述

卤过氧化物酶和展现卤过氧化物酶活性的化合物

适合于并入本发明方法的卤过氧化物酶是氯过氧化物酶、溴过氧化物酶和展现氯过氧化物酶或溴过氧化物酶活性的化合物。卤过氧化物酶形成一类酶，其能够在过氧化氢或过氧化氢生成系统存在下将卤化物(Cl-、Br-、I-)氧化为相应的次卤酸。

卤过氧化物酶依据它们对卤离子的特异性来分类。氯过氧化物酶(E.C.1.11.1.10)催化自氯离子形成次氯酸盐，自溴离子形成次溴酸盐和自碘离子形成次碘酸盐；而溴过氧化物酶催化自溴离子形成次溴酸盐和自碘离子形成次碘酸盐。然而，次碘酸盐经历自发歧化(spontaneous disproportionation)成碘，因此观察到的产物是碘。这些次卤酸盐化合物可随后与其它化合物起反应，形成卤代化合物。

在一个优选的实施方案中，本发明的卤过氧化物酶是氯过氧化物酶。

已经自多种生物体分离了卤过氧化物酶：哺乳动物、海洋动物、植物、藻类、地衣、真菌和细菌。普遍接受的是卤过氧化物酶是自然界中负责卤代化合物形成的酶，尽管可涉及其它酶。

已经自多种不同真菌分离了卤过氧化物酶，特别是真菌组暗色丝孢菌类(dematiaceous hyphomycetes)，如卡尔黑霉属(Caldariomyces)(例如，烟色卡尔黑霉(C.fumago))，链格孢属(Alternaria)，弯孢属(Curvularia)(例如疣状弯孢(C.verruculosa)和不等弯孢(C.inaequalis))，内脐蠕孢属(Drechslera)，细基格孢属(Ulocladium)和葡萄孢属(Botrytis)。

已经自细菌分离了卤过氧化物酶，如假单胞菌属(Pseudomonas)，例如吡咯菌素假单胞菌(P.pyrrocinia)和链霉菌属(Streptomyces)，例如，金黄色链霉菌(S.aureofaciens)。

在一个优选的实施方案中，所述卤过氧化物酶是自弯孢属菌种，特别是疣状弯孢或不等弯孢，如WO 95/27046中所述的不等弯孢CBS 102.42可得到的钒卤过氧化物酶(即含有钒或钒酸盐的卤过氧化物酶)，例如由WO 95/27046图2(通过提述全部并入)的DNA序列编码的钒卤过氧化物酶；或如WO 97/04102中所述的疣状弯孢CBS 147.63或疣状弯孢CBS 444.70可得到的钒卤过氧化物酶。优选地，所述卤过氧化物酶的氨基酸序列与自疣状弯孢(参见例如WO 97/04102中SEQ ID NO：2)或不等弯孢(例如由WO 95/27046图2中的DNA序列编码的成熟氨基酸序列)可得到的卤过氧化物酶的氨基酸序列具有至少90％同一性，优选95％同一性。