[发明专利]PCL/PGA止血泡沫

说明书

技术领域

本发明涉及在N端和C端具有疏水氨基酸基团的胶原相关肽(CRP)并涉及胶原模拟三聚体及其原纤，及它们的合成、使用方法和组合物；以及止血泡沫基材、此类基材的制造方法和刺激止血的方法。

背景技术

胶原是哺乳动物体内最丰富的蛋白质，其广泛分布在身体内，并且其绳状三螺旋和组装的原纤的刚度使其可以起到基本的结构作用，有助于为组织提供机械强度。最丰富的纤维胶原(I型、II型和III型)出现在皮肤、骨骼、软骨、腱、韧带、血管和眼睛的玻璃状液内。更复杂的非纤维胶原(例如IV型和VI型)形成二维和三维网络，用来支撑身体的间质组织，并且是可以附接上皮细胞层和内皮细胞层的基膜的基本组分。

通常，纤维胶原含有三条独立的肽链，它们彼此缠绕在一起，形成三螺旋(Rich A and Crick FHC，J.Mol.Biol.，1961，3，483-506(Rich A和CrickFHC，《分子生物学杂志》，1961年第3卷第483-506页))。胶原三螺旋的几何约束和稳定性要求每三个氨基酸中有一个甘氨酸(Gly或G)，从而形成重复的-GXY-序列，其中X和Y通常分别表示脯氨酸(Pro或P)和羟脯氨酸(Hyp或O)。胶原三螺旋的长度通常在300nm以上，并且具有1000个以上的氨基酸。通过此类胶原三螺旋的组装所得到的原纤长度超过1μm。

在未受损的健康组织内，胶原支撑血管壁及其周围组织，并且被内皮细胞层隐蔽，不能与在血流内流动的调节血小板凝聚过程的血小板接触。然而，由于病变血管壁内的机械创伤或动脉粥样硬化斑块破裂而对血管壁造成的损伤会去除内皮细胞层，让胶原与血小板和其他血浆蛋白相互作用，从而活化血小板，使其聚集和附着。这些过程对于血小板凝聚响应是必需的，并且为本领域所熟知。

三螺旋构型

因为胶原具有奇特的结构特征和生物重要性，所以这类蛋白质长期以来都让科学家们着迷。通过使用合成的胶原相关肽已经促进了对胶原三螺旋的结构、稳定性和功能的研究(Feng Y，Melacini G，Taulane JP and Goodman M，J.Am.Chem.Soc.，1996，118，10351-10358(Feng Y、Melacini G、Taulane JP和Goodman M，《美国化学会志》，1996年第118卷第10351-10358页)；Fields GB and Prockop DJ，Biopolymers 1996，40，345-357and references cited therein(Fields GB和Prockop DJ，《生物聚合物》，1996年第40卷第345-357页及其中引用的参考文献)；Holmgren SK，Taylor KM，Bretscher LE and Raines RT，Nature 1998，392，666-667(Holmgren SK、Taylor KM、Bretscher LE和Raines RT，《自然》，1998年第392卷第666-667页)；Jenkins CL and Raines RT，Nat.Prod.Rep.2002，19，49-59(Jenkins CL和Raines RT，《天然产物报告》，2002年第19卷第49-59页)；以及Shah NK，Ramshaw JAM，Kirkpatrick A，Shah C and Brodsky，B.Biochemistry 1996，35，10262-10268(Shah NK、Ramshaw JAM、Kirkpatrick A、Shah C和Brodsky，B.，《生物化学》，1996年第35卷第10262-10268页))。例如，使用具有特定识别基序的合成三螺旋肽使得可以深入研究胶原的受体结合性质。另外，胶原的三螺旋构象可以是其被血小板和其他胶原受体识别的先决条件。此外，某些三螺旋序列可以直接与血小板受体如GpVI直接相互作用，其中包括重复的三联体甘氨酸-脯氨酸-羟脯氨酸(GPO)序列。对于简单的胶原相关肽，(GPO)₁₀序列形成解链温度为58-70℃的热稳定的三螺旋。羟脯氨酸氨基酸通过促进水介导的氢键的形成和通过提供立体电子效应而使三螺旋结构稳定。