[发明专利]使用内标物质的测定方法

说明书

技术领域

本发明涉及使用内标物质的测定对象物质的测定方法。

背景技术

在毛细管电泳法中，以往进行的是使用1种内标物质，将其峰作为先端标记，来确定测定对象物质的大致位置(专利文献1)。但是，仅使用1种内标物质的情况下，受测定条件或试样中的夹杂物的影响，内标物质与测定对象物质的峰的位置关系发生变动。因此，在精度良好地确定测定对象物质的位置的情况下，使用分子量标记。

测定对象物质为DNA或RNA的情况下，也已知使用高分子量侧与低分子量侧的2种分子量标记来进行测定的情况。这种情况下使用的分子量标记为DNA或RNA，以其碱基数为基础进行设定。即，在进行DNA或RNA的电泳的情况下，通过精确设定分子量标记的位置，可以根据与2个分子量标记的位置关系来求出分子量。但是，此处使用的分子量标记为利用嵌入剂进行了标识的DNA或RNA等，具有稳定性差、在使用血清试样的情况下与试样中的物质反应、背景提高、分子量标记的峰变宽等问题。

另一方面，在测定对象物质为蛋白质或化合物的情况下，根据测定对象物质的分子量或电荷的不同，其迁移度不同，因而通常仅使用1种内标物质，其使用目的也是为了确定测定对象物质的大致位置。因此，在进行这样的蛋白质或化合物的测定的情况下，目前希望开发出不具有上述DNA或RNA在测定时的问题、能够精度良好地鉴定蛋白质或化合物的测定方法。

特别是在微芯片电泳这样的使用微细毛细管进行电泳的情况下，由于微细，因而即使在相同条件下进行，若进行芯片的替换，则物质的移动时间也有时会发生变化。因此，难以确定目的峰的情况也是常见的。进一步地，在这样的测定法的情况下，为了能够进行高灵敏度测定，必须要使用不会对测定带来影响且能够灵敏度良好地进行测定的内标物质。因此，也希望开发出在上述这样的条件下对测定物质的峰进行鉴定的测定方法。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：日本特开平2007-24610号公报

发明内容

发明所要解决的课题

本发明的课题在于提供在测定对象物质为蛋白质或化合物的电泳法中使用内标物质的测定方法。

用于解决课题的手段

鉴于上述状况，本发明人对于测定对象物质为蛋白质或化合物的情况下的利用使用内标物质的毛细管电泳法进行的测定方法的开发进行了深入研究，结果发现，作为内标物质，通过使用在分子内具有3个以上阴离子基团的化合物与该化合物的阴离子基团的1～3个被取代为阳离子基团的化合物的组合、或在分子内具有3个以上的阳离子基团的化合物与该化合物的阳离子基团的1～3个被取代为阴离子基团的化合物的组合来作为内标物质，即使测定对象物质为蛋白质或化合物，也能够容易地确定测定对象物质的峰。即，在由负朝向正方向泳动的毛细管电泳法中，由于在分子内具有3个以上阴离子基团的化合物在较早的时间被检测到峰、在分子内具有阳离子基团的化合物在较晚的时间被检测到峰，因而通过使用在分子内具有3个以上阴离子基团的化合物与使该化合物的阴离子基团或阳离子基团的1～3个呈相反电荷的物质，能够将测定对象物质调整在2个内标物质之间，由此能够容易地鉴定测定对象物质的峰，从而完成了本发明。

即，本发明涉及：

“一种基于毛细管电泳法的测定对象物质的测定方法，该测定方法的特征在于：将下述(1)或(2)用作内标物质，对测定对象物质的峰进行鉴定：(1)在分子内具有3个以上阴离子基团的化合物和该化合物的阴离子基团的1～3个被取代为阳离子基团的化合物的组合，(2)在分子内具有3个以上阳离子基团的化合物和该化合物的阳离子基团的1～3个被取代为阴离子基团的化合物的组合”。

发明效果

根据本发明，即使存在相邻的2个以上的峰，也能够容易地且精度良好地确定测定对象物质。另外，此处使用的标识物质不与试样中的物质发生反应，不会带来提高背景等的影响，因而即使在微量成分的分析中也能够精度良好地进行测定。

附图说明

图1为示出实施例1中的DNA标识抗体的制备方法的图。

图2为示出实施例1中的毛细管芯片的布置的图。

图3为示意性示出实施例1中的毛细管芯片的泳动用试样与试液的配置关系的图。

图4为实施例1中利用本发明的方法测定AFP时的电泳图谱。

图5为实施例1中利用本发明的方法测定PIVKA II时的电泳图谱。

具体实施方式

[本发明的在分子内具有3个以上阴离子基团的化合物(下面有时简称为本发明的含有阴离子基团的化合物。)]