[发明专利]嗜异性抗体免疫传感器干扰的改善

说明书

优先权要求

本申请要求2009年3月25日递交的、题目为“嗜异性抗体免疫传感器干扰的改善”的美国申请号12/411,325的优先权，以其全部通过引用而并入。

发明领域

本发明涉及在用于确定液体样品中分析物的存在或浓度的设备和方法中，减少或消除嗜异性抗体免疫传感器干扰。特别地，本发明涉及通过用γ球蛋白(例如IgM)及其片段修正生物学样品而减少或消除嗜异性抗体免疫传感器干扰。

发明背景

在生物学样品上就目的分析物进行了众多的实验室免疫测试，用于诊断，筛选，疾病分期，法医分析，怀孕测试，药物测试和其它原因。虽然少数定性测试(例如怀孕测试)被简化至简单的试剂盒用于患者在家使用，大多数定量测试仍然需要经过训练的技术人员在实验室环境中使用复杂装置的专门技术。实验室测试增加分析的成本并延迟结果。在许多情况下，延迟对于患者的病况或预后可以是有害的，例如对于表明心肌梗塞和心脏衰竭的标记物的分析。在这些以及类似的关键性情形中，以即时护理(point-of-care)准确、不昂贵并以最少的延迟进行此类分析是有利的。

例如，两点免疫测定(也称为夹心型免疫测定，其通常被用于确定生物学测试样品中分析物的浓度)被用于即时护理分析物检测系统中，所述系统由Abbott Point-of-care Inc.开发为系统。在典型的两点式酶联免疫吸附测定(ELISA)中，一种抗体结合到固体支持物上以形成“经固定的抗体”，而第二种抗体与产生信号的试剂(例如酶)缀合或结合以形成“信号抗体”。与含有待测量分析物的样品反应后，所述分析物被“夹”在经固定的抗体与信号抗体之间。洗掉样品和任何非特异性结合的试剂后，测量余留在固定支持物上的信号抗体的量，其应当与样品中分析物的量成比例。

已描述了许多类型的免疫测定设备和方法。Lauks在U.S.Pat.No.5,096,669中公开了一种用于成功测量血液样品中的分析物的一次性感应设备。Davis等人在U.S.Pat.Nos.5,628,961和5,447,440中公开了其它的、用于凝固时间设备。这些设备采用了读取装置和适合于所述读取装置的盒，用于关于时间测量血液样品中分析物的浓度和粘性变化的目的。U.S.Pat.Nos.5,096,669；5,628,961和5,447,440在此以其全部通过引用而并入。

电化学检测(其中分析物的结合直接或间接引起接近电极的电活性物种的活性变化)也被应用于了免疫测定。关于电化学免疫测定的综述，参见Laurell等人，Methods in Enzymology，vol.73，″Electroimmunoassay″，Academic Press，New York，339，340，346-348(1981)。

对于在受限的空间中构造多层的感应器结构而言，精密加工技术(例如光刻法和等离子体沉积)是有吸引力的。Cozzette等人的U.S.Pat.No.5,200,051中公开了用于电化学免疫传感器精密加工的方法(例如在硅基质上)，在此以其全部通过引用而并入。这些包括分配方法，用于将生物学试剂(例如抗体)附着于表面的方法(包括光形成层(photoformed layer)和微颗粒乳胶)，以及用于进行电化学测定的方法。

在电化学免疫传感器中，分析物与其相应抗体的结合使电极处的电活性物种产生活性变化，所述电极保持合适的电化学势以引起所述电活性物种的氧化或还原。有许多用于满足这些条件配置。例如，电活性物种可被直接附着至分析物，或者抗体可被共价地附着至酶，所述酶由无电活性的底物产生电活性物种，或者破坏电活性的底物。关于电化学免疫传感器的综述，参见M.J.Green(1987)Philos.Trans.R.Soc.Lond.B.Biol.Sci.316：135-142。