[发明专利]利用可穿透细胞的重编程转录因子建立诱导性多能干细胞用于个性化干细胞疗法

权利要求书

一种可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，所述可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质包含融合到重编程转录因子的一个末端或两个末端的大分子转导结构域(MTD)，

其中所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列，

其中所述MTD具有选自SEQ ID NO：16和18的氨基酸序列。

如权利要求1所述的可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，其中所述MTD为具有如SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列的JO-84 MTD或具有如SEQ ID NO：18所示的氨基酸序列的JO-86 MTD。

如权利要求1所述的可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，其中所述重组蛋白质包含融合至任一末端的核定位序列(NLS)和/或组氨酸标签亲和结构域中的至少一种。

如权利要求1至3的任一项所述的可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，其特征在于选自：

JO-84 MTD被融合至重编程转录因子的N-末端的重组蛋白质，其中，所述JO-84 MTD具有如SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列；

JO-84 MTD被融合至重编程转录因子的C-末端的重组蛋白质，其中，所述JO-84 MTD具有如SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列；

JO-84 MTD被融合至重编程转录因子的两个末端的重组蛋白质，其中，所述JO-84 MTD具有如SEQ ID NO：16所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列；

JO-86 MTD被融合至重编程转录因子的N-末端的重组蛋白质，其中，所述JO-86 MTD具有如SEQ ID NO：18所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列；

JO-86MTD被融合至重编程转录因子的C-末端的重组蛋白质，其中，所述JO-86MTD具有如SEQ ID NO：18所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列；和

JO-86 MTD被融合至重编程转录因子的两个末端的重组蛋白质，其中，所述JO-86 MTD具有如SEQ ID NO：18所示的氨基酸序列，所述重编程转录因子具有选自SEQ ID NO：2、4、6、8、10和12的氨基酸序列。

如权利要求1至4的任一项所述的可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，其中所述重组蛋白质具有选自以下的氨基酸序列：

对于Nanog，SEQ ID NO：22、24、26、28、30或32；

对于Oct4，SEQ ID NO：50、52、54、56、58或60；

对于Sox2，SEQ ID NO：78、80、82、84、86或88；

对于Klf4，SEQ ID NO：106、108、110、112、114或116；

对于cMyc，SEQ ID NO：134、136、138、140、142或144；并且

对于Lin28，SEQ ID NO：162、164、166、168、170或172。

如权利要求1至4的任一项所述的可穿透细胞的重编程转录因子重组蛋白质，其中所述重组蛋白质具有选自以下的氨基酸序列：

对于Nanog，SEQ ID NO：36、38、40、42、44或46；

对于Oct4，SEQ ID NO：64、66、68、70、72或74；

对于Sox2，SEQ ID NO：92、94、96、98、100或102；

对于Klf4，SEQ ID NO：120、122、124、126、128或130；

对于cMyc，SEQ ID NO：148、150、152、154、156或158；并且

对于Lin28，SEQ ID NO：176、178、180、182、184或186。